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结核分枝杆菌Rv1009基因的克隆、表达及亲和层析纯化
引用本文:薛莹,姜泓,柏银兰,高雪,王丽梅,徐志凯.结核分枝杆菌Rv1009基因的克隆、表达及亲和层析纯化[J].科学技术与工程,2006,6(14):2031-2034.
作者姓名:薛莹  姜泓  柏银兰  高雪  王丽梅  徐志凯
作者单位:第四军医大学微生物学教研室,西安,710033
摘    要:克隆表达结核分枝杆菌Rv1009基因,序列测定正确后进行融合表达、纯化。采用聚合酶链反应(PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增了Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入到pGEM—Teasv中,序列测定正确后.再亚克隆到融合表达载体pPro—EX HT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rv1009蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化。获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009蛋白基因.得到融合6个组氨酸残基的Rv1009蛋白纯度大于80%。证实构建了结核分枝杆菌Rv1009基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白.为以后的深入研究奠定了基础.

关 键 词:结核分枝杆菌  克隆  表达  纯化
文章编号:1671-1815(2006)14-2031-04
收稿时间:2006-03-17
修稿时间:2006年3月17日

Cloning and Fusion Expression of Mycobacterium tuberculosis Rv1009 Gene and Its Purification Using Affinity Chromatography
XUE Ying,JIANG Hong,BAI Yinlan,GAO Xue,WANG Limei,XU Zhikai.Cloning and Fusion Expression of Mycobacterium tuberculosis Rv1009 Gene and Its Purification Using Affinity Chromatography[J].Science Technology and Engineering,2006,6(14):2031-2034.
Authors:XUE Ying  JIANG Hong  BAI Yinlan  GAO Xue  WANG Limei  XU Zhikai
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis clone expression purified
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