| 磁珠提取技术在副溶血弧菌检测中的应用 |
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| 引用本文： | 肖雨诗,曹强,黄蓉,程雷,刘娜,刘欢,吴立冬.磁珠提取技术在副溶血弧菌检测中的应用[J].北京工商大学学报(自然科学版),2021,39(6):165-174. |
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| 作者姓名： | 肖雨诗 曹强 黄蓉 程雷 刘娜 刘欢 吴立冬 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学 水产与生命学院, 上海 201306;中国水产科学研究院 农业农村部水产品质量安全控制重点实验室, 北京 100141;北京工商大学 北京市食品添加剂工程技术研究中心, 北京 100048 |
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| 摘 要： | 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,为解决副溶血弧菌检测步骤复杂且周期长的问题,研究开发了一种磁珠提取与PCR联用技术快速检测食品中的副溶血弧菌。首先通过碱性共沉淀法完成Fe3O4磁珠的制备,随后在室温条件下通过水解正硅酸乙酯完成Fe3O4@SiO2磁珠制备。探讨了正硅酸乙酯添加量对Fe3O4@SiO2磁珠粒径和磁性的影响。以DNA提取能力为目标,已知浓度DNA为提取对象,分析了Fe3O4@SiO2磁珠粒径和提取体系pH值对Fe3O4@SiO2磁珠与DNA结合能力的影响。结果表明,Fe3O4@SiO2磁珠结合副溶血弧菌DNA的较佳粒径为105.89nm、Fe3O4@SiO2磁珠的SiO2层为25nm,此条件下Fe3O4@SiO2磁珠表面光滑、分散性良好、饱和磁化强度高,在磁场的作用下10s即可完成副溶血弧菌DNA与杂质的分离,副溶血弧菌DNA的提取率高达80%(提取体系pH值为5.0)。采用优化后的Fe3O4@SiO2磁珠进行DNA提取,结合PCR联用技术,对92份市售水产样品(32份对虾、25份牡蛎、35份贻贝)进行副溶血弧菌筛查。结果表明,Fe3O4@SiO2磁珠提取的DNA均可直接用于PCR检测,被测水产样品中有17份样本的副溶血弧菌检测结果为阳性。此技术与国标检测方法(GB 4789.7—2013)相比,检测时间由一周缩短至4h,提高了副溶血弧菌的检测效率。磁珠提取结合PCR联用技术可检测不同食品中的多种微生物菌种,此研究为食品中的微生物快速检测提供了一种实用新方法。
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| 关 键 词： | 副溶血弧菌 磁珠提取 DNA提取 PCR 食品微生物检测 |
| 收稿时间： | 2020/10/9 0:00:00 |
Application of Magnetic Bead Extraction Technology in Detection of Vibrio parahaemolyticus |
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| XIAO Yushi,CAO Qiang,HUANG Rong,CHENG Lei,LIU N,LIU Huan,WU Lidong.Application of Magnetic Bead Extraction Technology in Detection of Vibrio parahaemolyticus[J].Journal of Beijing Technology and Business University:Natural Science Edition,2021,39(6):165-174. |
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| Authors: | XIAO Yushi CAO Qiang HUANG Rong CHENG Lei LIU N LIU Huan WU Lidong |
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| Institution: | College of Fisheries and life, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Control of Quality and Safety for Aquatic Products, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China;Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing 100048, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio parahaemolyticus magnetic bead extraction DNA extraction PCR microbiological detection of food |
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