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薄壳山核桃嫁接愈合过程中CiMYB46基因的克隆与表达分析
引用本文:莫正海,李风达,苏文川,曹凡,彭方仁,李永荣.薄壳山核桃嫁接愈合过程中CiMYB46基因的克隆与表达分析[J].南京林业大学学报(自然科学版),2019,43(5):156.
作者姓名:莫正海  李风达  苏文川  曹凡  彭方仁  李永荣
作者单位:1.南京林业大学,南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林学院,江苏 南京 2100372.江苏省中国科学院植物研究所, 江苏 南京 2100143.南京绿宙薄壳山核桃科技有限公司,江苏 南京 210007
基金项目:国家自然科学基金项目(31870672);江苏省林业三新工程项目(LYSX[2016]44);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
摘    要:【目的】为探索薄壳山核桃嫁接愈合的分子机理,对CiMYB46基因进行克隆,并分析其表达模式及启动子区的诱导元件。【方法】提取薄壳山核桃芽接愈合部位不同发育时期的RNA,根据转录组学分析结果设置引物,通过RT-PCR进行基因克隆。以基因组DNA为模板,使用PCR方法克隆目标基因的启动子区域。【结果】克隆得到1条序列,该序列的开放阅读框(ORF)从起始密码子ATG开始,到终止密码子TAA结束共969 bp,编码322个氨基酸,所推导的氨基酸含有MYB结构域,与拟南芥中的AtMYB46聚为一类,将其命名为CiMYB46。实时定量PCR分析显示,CiMYB46在嫁接体发育的维管组织形成期具有高表达,并与部分次生壁合成相关功能基因具有共表达趋势。克隆得到CiMYB46起始密码子上游1 070 bp的启动子区域,经PlantCARE分析,结果显示CiMYB46启动子区域具有CAAT-box及TATA-box的基本顺式作用元件和多个胁迫诱导元件,同时还具有响应包括脱落酸、茉莉酸甲酯、赤霉素、水杨酸在内的激素调控元件。【结论】CiMYB46可能与薄壳山核桃嫁接愈合过程中维管组织的形成有关,并受赤霉素诱导。

关 键 词:薄壳山核桃  嫁接  基因克隆  CiMYB46基因  MYB转录因子  
收稿时间:2018-11-26

Cloning and expression analysis of CiMYB46 in the graft healing process of Carya illinoinensis
Abstract:
Keywords:
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