| G蛋白偶联受体激酶5在大肠杆菌中的表达纯化 |
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| 引用本文： | 蔡昕明,赵健.G蛋白偶联受体激酶5在大肠杆菌中的表达纯化[J].华东理工大学学报(自然科学版),2003,29(5):531-533. |
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| 作者姓名： | 蔡昕明 赵健 |
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| 作者单位： | 华东理工大应用生物学系,上海,200237 |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR扩增得到了人G蛋白偶联受体激酶5(GProtein-coupledreceptorki-nase,GPK5)的基因,将其克隆到表达载体pET-28a中,并将该质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),在10μmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPIG)诱导培养下表达,通过分离纯化,得到部分纯化的GRK5蛋白。体外活性测定表明,纯化后的GPK5能够特异性地磷酸化视紫红质。动力学常数Km=4.3μmol/L,Vmax=25nmol/(mg·min),与文献报道的从真核表达系统中纯化得到的GRK5相近。
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| 关 键 词： | G蛋白偶联受体激酶-5 基因表达 蛋白质纯化 活性测定 |
| 文章编号： | 1006-3080(2003)05-0531-03 |
| 修稿时间： | 2002年11月20 |
Expression and Purification of GRK5 in E.coli |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | G-protein-coupled receptor kinase-5(GRK-5) gene expression protein purification enzyme characterization |
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