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牛小肠碱性磷酸酶部分性质研究
作者姓名:余同  张营  赵欣平  高举  杨梅强
作者单位:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划
摘    要:摘要:用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶(BIAP).提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE呈现单一条带,且不含DNA核酸酶.该酶催化对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)水解反应的最适pH值为9.7,pH小于6.5大于11.5均不稳定;最适温度为45℃,高于50℃不稳定.Km值为0.29mmol/L.45℃,pH9.7时最大反应速度(Vmax)为4.6μmol/(L•min).利用SDS-PAGE测定酶亚基的分子量为66KD. Mg2+、Mn2+和Ca2+对酶有不同程度的激活作用,Zn2+和EDTA对酶有抑制作用。随着Mg2+、Zn2+和EDTA浓度增加,270nm处紫外吸收值增加.

关 键 词:牛小肠  碱性磷酸酶  分离纯化  酶学性质  金属离子
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