牛小肠碱性磷酸酶部分性质研究 |
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作者姓名: | 余同 张营 赵欣平 高举 杨梅强 |
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作者单位: | 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064 |
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基金项目: | “十一五”国家科技支撑计划 |
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摘 要: | 摘要:用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150
凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶(BIAP).提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE呈现单一条带,且不含DNA核酸酶.该酶催化对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)水解反应的最适pH值为9.7,pH小于6.5大于11.5均不稳定;最适温度为45℃,高于50℃不稳定.Km值为0.29mmol/L.45℃,pH9.7时最大反应速度(Vmax)为4.6μmol/(L•min).利用SDS-PAGE测定酶亚基的分子量为66KD. Mg2+、Mn2+和Ca2+对酶有不同程度的激活作用,Zn2+和EDTA对酶有抑制作用。随着Mg2+、Zn2+和EDTA浓度增加,270nm处紫外吸收值增加.
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关 键 词: | 牛小肠 碱性磷酸酶 分离纯化 酶学性质 金属离子 |
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