棉疫病菌诱导非寄主过敏反应激发子基因的克隆 |
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引用本文: | 李俊,张海峰,张正光,王源超,郑小波.棉疫病菌诱导非寄主过敏反应激发子基因的克隆[J].科学通报,2006,51(22):2638-2643. |
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作者姓名: | 李俊 张海峰 张正光 王源超 郑小波 |
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作者单位: | 1. 南京农业大学植保学院,农业部病虫监测与治理重点开放实验室,南京,210095;苏州市植物保护植物检疫站,苏州,215006 2. 南京农业大学植保学院,农业部病虫监测与治理重点开放实验室,南京,210095 |
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基金项目: | 致谢 感谢JohnInnes中心Sainsbury实验室惠赠PVX病毒表达载体.本工作为国家自然科学基金(批准号:30300228)、教育部高校博士点基金(批准号:20020307035)和南京农业大学SRT(批准号:0402A04)资助项目. |
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摘 要: | 采用功能筛选策略从以PVX病毒载体建立的棉疫病菌(Phytophthora boehmeriae) cDNA文库中克隆了能诱导烟草产生过敏反应的激发子基因(片段). 以农杆菌Mog101为宿主、利用PVX病毒表达载体构建了含有6800个单克隆的棉疫病菌cDNA文库, 采用牙签接种本氏烟(Nicotiana benthamiana), 从4100个克隆中筛选到12个能引起烟草过敏反应的阳性克隆. 对上述阳性克隆进行序列测定和分析, 结果显示, 其中7个与已知的基因具有较高的同源性, 其中PBC43编码一个特异的elicitin蛋白; PBC163编码一个Rab蛋白, 与大豆疫霉的RAB同源性较高; PBC241编码抗增殖蛋白(prohibitin); PBN62编码一个热激蛋白60 (HSP60). 还有5个克隆在公共数据库中没有同源基因, 提示可能是该病原菌特异的激发子基因. 上述结果表明, 利用病毒表达载体构建cDNA文库, 用功能筛选策略可从棉疫病菌全基因组范围内筛选诱导烟草产生过敏反应的激发子基因, 该方法可望为其他植物病原菌激发子基因的克隆提供技术平台.
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关 键 词: | 棉疫病菌 非寄主抗性 过敏性反应 PVX病毒表达载体 激发子 |
收稿时间: | 2006-07-07 |
修稿时间: | 2006-07-072006-09-27 |
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