| 重组牛肠激酶轻链在大肠杆菌中的表达和纯化 |
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| 引用本文： | 黄磊,阮红,徐志南,顾玮彦,岑沛霖.重组牛肠激酶轻链在大肠杆菌中的表达和纯化[J].江南大学学报(自然科学版),2007,6(4):478-482. |
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| 作者姓名： | 黄磊 阮红 徐志南 顾玮彦 岑沛霖 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学,材料与化学工程学院,浙江,杭州,310027
2. 浙江大学,城市学院,浙江,杭州,310015 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30370039) |
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| 摘 要： | 密码子优化全基因合成了牛肠激酶轻链基因(sBEKLC),采用pET-39b( )构建了融合表达载体,在大肠杆菌中进行了成功表达.37℃在含30 mg/L卡那霉素的LB培养基中培养,当细胞密度(D600)达到0.5时,降低温度到28℃,加入终浓度为0.1 mM的异丙基硫代-βD-硫代半乳糖苷诱导外源蛋白表达,继续培养6 h后收集菌体,融合蛋白(DsbA-sBEKLC)产量达到151.2mg/L,相当于80.6 mg/L sBEKLC.使用渗透冲击技术从细胞周质中提取sBEKLC,经过亲和层析可从每升发酵液中得到6.8 mg sBEKLC,经检测sBEKLC具有生物活性.
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| 关 键 词： | 肠激酶 融合表达 纯化 生物活性 |
| 文章编号： | 1671-7147（2007）04-0478-05 |
| 收稿时间： | 2006-04-19 |
| 修稿时间： | 2006-04-192006-06-28 |
Expression and Purification of Bovine Enterokinase Light Chain in Recombinant Escherichia coli |
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| HUANG Lei,RUAN Hong,XU Zhi-nan,GU Wei-yan,CEN Pei-lin.Expression and Purification of Bovine Enterokinase Light Chain in Recombinant Escherichia coli[J].Journal of Southern Yangtze University:Natural Science Edition,2007,6(4):478-482. |
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| Authors: | HUANG Lei RUAN Hong XU Zhi-nan GU Wei-yan CEN Pei-lin |
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| Institution: | 1. College of Materials Science and Chemical Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China; 2. City College, Zhejiang University, Hangzhou 310015, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | enterokinase fusion expression purification enzyme activity |
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