酶法生产鸟氨酸菌株的筛选与培养

从土壤中筛选到一株可以利用胞内精氨酸酶生产鸟氨酸的菌株XT-025,通过形态特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列分析,初步鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),这是首次发现该种微生物可用以生产鸟氨酸。通过对其培养条件和转化条件的优化,确定了最佳的培养时间为24h,最合适的转化液成分为0.3mol/L的碳酸盐缓冲液,V(Na₂CO₃)∶V(NaHCO₃)为8∶2。同时发现Mn²⁺对精氨酸酶有很强激活作用,在添加适量Mn²⁺的条件下,鸟氨酸的产量能够达到50g/L,精氨酸摩尔转化率达到100%,而Sn⁴⁺和Cu²⁺则会使酶完全失活。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对IL-4刺激的小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶-1表达的影响

为探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对白介素-4(IL-4)刺激的巨噬细胞精氨酸酶1(Arg-1)和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达的影响.将6~8周龄Balb/c小鼠经无血清DMEM培养基刺激后,收集腹腔巨噬细胞用于体外培养.体外培养的巨噬细胞经20ng/mL IL-4和不同浓度EGCG处理后,用实时荧光定量PCR(RTqPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测Arg-1和iNOS的mRNA表达水平和含量.结果显示IL-4和EGCG单独处理均可显著刺激Arg-1的表达和抑制iNOS的表达,而EGCG(12.5~50μM)增强IL-4刺激的Arg-1表达和IL-4对iNOS表达的抑制作用,且存在剂量依赖效应.上述结果提示EGCG以剂量依赖方式促进IL-4刺激的Arg-1表达、抑制iNOS的表达.     

复合氨基酸营养价值及对小鼠体内酶活性的影响

以豆类蛋白水解液中提取的复合氨基酸为原料，小白鼠为对象，研究复合氨基酸的营养价值及对小鼠体内酶活性的影响。结果表明它有调节小鼠体内酶活性的作用。可使ＳＯＤ、过氧化氢酶和精氨酸酶的活性升高，乳酸脱氢酶活性降低，蛋白质的表观消化率、食物转化效能及血红蛋白和血清蛋白总量提高。     

生长激素释放肽促生长的免疫调节

采用固相法合成了生长激素释放肽（ＧＨＲＰ）,研究了其促生长及免疫调节活性,腹腔连续注射（ｉｐ）１００,３００,１０００,５０００μｇ／ｋｇ ＧＨＲＰ１０ｄ后,发现小鼠体重对照组显明增加;复腔连续细胞（ＰＭΦ）精氨酸酶（Ａｒｇｉａｓｅ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性提高约５０％;红细胞Ｃ３ｂＲ及ＩＣ花环率、血清溶血素含量增加８０％左右,提示ＧＨＲＰ具有免疫调节活性。     

人I型精氨酸酶的聚乙二醇修饰条件探索

精氨酸醇，又名L-精氨酸尿素水解酶，是一种将精氨酸水解成鸟氨酸和尿素的水解酶，本身为内源性蛋白酶。在人体内尿素循环中起到重要作用。工业上可利用其水解活性以精氨酸生产鸟氨酸。另外，精氨酸酶还有着显著的抑制肿瘤细胞分裂的作用。但是，在临床应用中，存在以下缺点：体内循环半表期短，另被循环系统清除，需要多次给药等问题，给患者的日常生活带来很大的不使。而聚乙二醇（PolyethyleneGlycol，PEG）化学修饰能够降低蛋白免疫原性以及有效延长药物半衰期，是解决上述问题的有效途径之一。