抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选

目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pC ANTA B5E中,转化于大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单...     

结核分枝杆菌H37Rv株与耐异烟肼菌株间细胞壁蛋白质组双向电泳图谱比较

利用双向电泳技术可以对体外培养的结核分枝杆菌非耐药型菌株和耐药型菌株进行细胞壁蛋白质组学比较,寻找与耐药相关的蛋白质．结核分枝杆菌H37Rv株与耐异烟肼菌株在Middlebrook 7H9 Broth培养基中37℃摇床培养1个月后,从培养物中提取结核分枝杆菌细胞壁蛋白．以pH4～7的IPG预制胶条为第一向等电聚焦,以SDS-PAGE为双向电泳第二向,经过银氨染色,图像扫描后,利用软件分析处理图像．在结核分枝杆菌H37Rv株和耐异烟肼菌株的细胞壁蛋白质凝胶图谱中分别检测出499和582个蛋白质斑点．它们的蛋白质分子质量分布基本相似,其中有102个斑点差异显著．这为研究耐异烟肼菌株的耐药机制提供了蛋白质组学方面的信息．     

PCR检测结核杆菌343例

ＰＣＲ检测结核杆菌３４３例．阳性６９例，阳性率２０．１１％．ＰＣＲ技术具有高度的敏感性和特异性．能检测结核杆菌培养阴性及涂片阴性的结核病患者．对ｘ线检查阴性患者也有一定的阳性率．     

r结核分枝杆菌PhoP／PhoR基因重组穿梭表达质粒的构建及鉴定

为构建结核杆菌PhoPR双组分系统PhoP、PhoR基因的重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR并对其进行鉴定。采用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA为模版,利用PCR技术分别扩增PhoP、PhoR基因编码序列,先克隆于T—Vector pMD19（Simple）,再亚克隆至大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV361,并转化E.coli DH5α感受态细胞,提取所得的阳性克隆子获得重组表达质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,通过PCR及双酶切鉴定。结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA中扩增出的PhoP、PhoR基因与GenBank公布的序列一致,经过PCR及双酶切鉴定,表明PhoP、PhoR基因均成功插入了pMV361穿梭载体。由此可知,成功构建了重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,为进一步研究PhoPR双组分系统奠定了基础。     

指示剂法快速检测结核杆菌耐药试验的探讨

结核杆菌快速耐药试验方法学的研究，是结核病细菌学急待解决的问题。国内经典的检测方法都存在着各自的优缺点，而未能改变现行改良罗氏培养耐药试验方法[1]。因此我们探讨用指示剂快速检测结核杆菌耐药试验的方法。1材料与方法1．12％B指示剂1．2含药培养基以舒通培养基为基础，制成液体培养基，经103．43KPa，75％乙醇处理后，15分钟高压灭菌加入药物，然后分装于15mm×10mm小试管中，每管吸1．0ml，其中药物含量：SM：100μg／ml10μg／mlINH：10μg／ml1μg／mlPAS：10μg／ml1μg／ml25μg／ml5μg／mlKM：50μg／ml10μg／mlEM…     

结核疫苗研究进展

目的:回顾卡介苗(BCG)的应用情况,介绍关于结核疫苗研究进展的最新信息。方法:查阅大量关于结核疫苗研究的最近几年的文献。结果:有多种抗结核疫苗正在研究中,例如卡介苗、结核活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗以及转基因植物疫苗等。结论:BCG仍是目前唯一可应用的抗结核疫苗,但是许多新疫苗己在动物模型中显示出潜力并开始进入临床试验。     

女性乳房结核的外科治疗体会

对26例女性乳房结核的外科治疗分析，认为乳房结核少见。易误诊为肠子腺癌，在临床中分为原发性和继发性两种。原发性多见。前者是由结核杆菌血源性传播或由乳头直接侵入的结果。乳房结核多以肿块为首发症状而就诊，病程长，发展缓慢，好发于30岁左右的妇女，B超有助诊断。而手术治疗是一种治愈率高，疗程短、彻底、有效的治疗方法。     

结核杆菌原发耐药间隔五年对比分析

目的 :探讨归口管理对原发耐药菌的影响。方法 :回顾分析 1994- 1995年度与 1998- 1999年度结核杆菌原发耐药情况。结果 :1998- 1999年度原发耐药率较 1994- 1995年度明显下降。结论 :我院通过五年归口管理 ,降低了原发耐药菌的比例 ,但仍需进一步加强归口管理力度 ,从而有效控制原发耐药菌的发生。     

科技要闻

研制细胞膜蛋白激光检测技术现有的检测细胞膜手段大多是将膜蛋白从其所处环境中分离,或用不同方式如荧光标签加以修改,以分析它们的活性。这些方法不仅昂贵耗时,还可能会影响目标膜蛋白的功能。美国范德比尔特大学化学生物研究院化学教授Darryl J.Bornhop等开发了一种名为后向散射干涉仪(BSI)的新型激光技术,能精确检测出膜蛋白和自然界中各种分子之间的结合力。BSI操作起来很简单,只要把2种分子混合装     

表达结核杆菌抗原的重组酿酒酵母免疫小鼠研究

近年来研究显示全细胞重组酿酒酵母疫苗具有治疗性疫苗潜能.为了研究重组酿酒酵母结核病候选疫苗的免疫效果,将IFN-γ基因与结核杆菌抗原蛋白Ag85B、ESAT6的基因融合,利用pHR酿酒酵母表达系统和同源重组方法,成功构建了以酿酒酵母Y16为宿主的表达融合蛋白IF-γ-Ag85B和IF-γ-ESAT6-Ag85B的重组酿...