小鼠RTN3基因mRNA和蛋白在小鼠中枢神经系统的分布模式

根据与人RTN3基因同源的小鼠EST AA237377设计筛库引物, 克隆得到小鼠RTN3 cDNA, 该cDNA长2814 bp, 含1个714 bp的可读框, 编码1个具237个氨基酸的蛋白. Northern杂交检测该基因在小鼠不同组织中的表达谱, 发现它有3个转录本, 分别为1.8, 2.8和4.2 kb, 其中1.8和2.8 kb的转录本存在于多种组织中, 2.8 kb的转录本在脑中的表达量最高, 4.2 kb的转录本仅在脑中存在. 用成年小鼠脑和脊髓切片进行原位杂交和免疫组织化学反应, 发现该基因在中枢神经系统的非胶质细胞中广泛表达, 且在某些区域表达较高, 如海马、大脑皮层、下丘脑及一些神经核团.     

金鱼母体因子β-catenin cDNA的克隆及在胚胎发育

核质相互作用一直是动物胚胎发育领域的研究焦点, 母体因子对于脊椎动物胚胎发育的启动具有决定性作用. 在已有的研究中, 直接研究母体因子β-catenin基因的时空表达规律与其功能的相关性还较少见, 因此, 我们对该基因在金鱼胚胎发育全程中的作用进行了时空性的跟踪研究. 报道了金鱼β-catenin cDNA全基因序列, 并与斑马鱼的β-catenin cDNA序列和氨基酸序列进行了比较, 结果表明, 两者具有很高的同源性, 分别为93% (2227/2384 bp)和98.5% (768/780 aa); 系统地研究了β-catenin基因在金鱼胚胎发育全过程中的表达规律; 用反义RNA和绿色荧光蛋白基因共注射技术, 直接活体考察了β-catenin基因活性对金鱼胚胎发育的影响. 结果证明, b-catenin在胚胎中的分布是动态的, 主要定位于体轴和背部组织, 以及头尾结构. b-catenin活性的丧失, 导致胚胎背部结构严重缺损和沿前后轴组织发育受阻, 并在幼体形成前死亡, 说明该基因是胚胎启动和发育的必要因子之一.     

黑脊倒刺鲃scp3基因的克隆及其表达

为了从分子水平上研究鱼类生殖细胞发育的机制,首次从重要的经济养殖鱼类黑脊倒刺鲃中克隆出了生殖细胞减数分裂Ⅰ相关基因scp3的部分同源序列scscp3:该序列长477 bp,编码159个氨基酸.经比对发现,其编码的蛋白序列与斑马鱼scp3蛋白等具有高度的同源性.不同组织RT-PCR结果显示:scscp3基因仅在生殖细胞中...     

同源盒基因Lhx4在成年大鼠外周神经损伤后的表达变化研究

为探讨作为发育基因之一的LIM同源盒基因是否参与调控成年动物神经损伤修复过程,研究利用坐骨神经夹伤的外周神经损伤模型,采用RT-PCR方法并将其产物进行高效液相色谱分析,相对定量分析同源盒Lhx4基因在成年大鼠脊髓腹侧运动神经元中不同损伤时相的表达变化;应用原位杂交方法进一步检测坐骨神经夹伤后Lhx4mRNA在损伤及对照侧脊髓运动神经元的表达.结果显示,成年大鼠在坐骨神经夹伤3d,7d后,损伤侧脊髓运动神经元中Lhx4mRNA表达量比对照侧明显增高,此结果亦被原位杂交实验证实.以上结果提示,作为一类重要的转录因子,LIM同源盒基因家族中的Lhx4基因可能在成年动物外周运动神经元损伤后的轴突再生和神经功能重建中起调控作用.     

果蝇细胞周期蛋白Cyclin D在胚胎发育不同时期的表达

细胞周期蛋白Cyclin D(CycD)是发育中重要的蛋白,作者利用原位杂交法和免疫组化法,分别对野生型的果蝇w1118以及本研究室构建的一个转基因株系cycD-lacZ进行分析,从而建立了在果蝇发育的早期胚胎发育各阶段cycD mRNA的表达模式.结果表明:Stage 5时期,cycD mRNA集中于胚胎表面新生成的细胞处.Stage10,在发育中的神经系统,前中肠和后中肠处可以检测到cycD的mRNA.Stage14,cycD基因于中肠有着强烈的表达.cycD mRNA在胚胎发育中的表达模式的确立,为后期研究CycD在胚胎发育中所起的作用奠定了基础.     

PCR和原要交技术检测鼻咽癌石蜡组织中HHV—6DNA

目的：为了解人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）与鼻咽癌（ＮＰＣ）的可能关系，检测了ＮＰＣ发生不同阶段的石蜡组织中ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。方法：采用ＰＣＲ、斑点杂交和原位杂交技术，共检测了４２例鼻咽癌石蜡组织、２１例鼻咽癌前病变石蜡组织和２７例正常鼻咽石蜡组织ＨＨＶ－６ＤＮＡ的存在情况。结果：通过ＰＣＲ扩增，在４２全ＮＰＣ组织中检出１３例存在ＨＨＶ－６ＤＮＡ，占３１％；２１例鼻咽癌前病变组织中１例阳性     

人类精子间期核荧光原位杂交

目的：研究人类精子染色体畸变。方法：Ｅ和３号染色体涂染探针对人类精子间期核进行荧光原位杂交，共检测了１０名正常健康男性，２名涉及３号染色体平衡易位携带ｔ（３：７）、ｔ（３：９）的精子。结果：正常男性精子间期核中３号染色数目和（或）结构畸变率〈２％，涉及３号染色体平衡易位携带的畸变率〉１０％。结论：荧光原位杂交技术可秀于检测精子间期核染色体的畸变．     

钙调素mRNA在烟草花药发育过程中的原位定位

利用ＲＮＡ原位杂交技术，以地高辛标记的反义ＲＮＡ为探针，研究了烟草花药发育过程中钙调素ｍＲＮＡ时空分布特点。烟草花药各个不同发育阶段均有钙调素ｍＲＮＡ的分布，但表达水平有明显的时空差异。花药发育早期，钙调素ｍＲＮＡ表达很强，主要分布于表皮，绒毡层和药隔和薄壁细胞等，尤其是即将进行减数分裂的小孢子母细胞核部位和减数分裂时期的染色体部位有较多的ｍＲＮＡ积累，随着花药的发育，药壁和花粉中的表达量逐渐减弱     

甾类激素合成灵敏调节蛋白在大鼠黄体中的表达及其受IFNγ的调节

甾体激素合成灵敏调节蛋白（ＳｔＡＲ）是甾体激素合成的关键调节因子，甾体激素的合成需要将胆固醇从细胞质转运到位于线粒体内膜的细胞色素Ｐ４５０侧链切除复合体上，这是甾体激素合成的限速步骤，它依赖于ＳｔＡＲ的从头合成成，以成年大鼠假孕模型，用原位杂交和免疫互组化的方法研究了不同时期大鼠黄体中ＳｔＡＲ ｍＲＮＡ和抗原的及其受ＩＦＮγ对ＳｔＡＲ表达有抑制作用。