偶氮染料脱色优势菌的特性及基因定位初步研究

对分离到的两株偶氮染料脱色优势菌的特性和控制脱色的基因定位进行了研究,结果表明,两株脱色优势菌均为兼性厌氧菌,生长受ｐＨ值影响较大,适应温度范围较广;它们均能有效脱除偶氮染料的色度;它们都含有质粒,其携有控制偶氮还原酶产生的基因;通过质粒转化得到的转化子较之其野生菌有更好的脱色效果．     

超声波强化提取牡丹花黄酮

采用超声波技术对牡丹花黄酮提取进行强化，选择超声频率、乙醇浓度、超声时间、物料比为因素进行正交实验，优选出超声提取最佳工艺：即以70％的乙醇，料液比为1：20，在频率为22kHz的超声波下处理10min，提取率可达91．5％。具有提取效率高，提取时间短，温度低的优点。     

强MAR的分离及其体内外功能鉴定

将MAR（matrix attachment region)构建到外源基因表达盒两侧可以促进外源基因的表达克服基因沉默。用PCR方法从烟草和拟南芥中分离到4个新的MAR序列（TM2，TM3，AM1和AM2），以水稻悬浮细胞为材料，提取大量细胞核制备核基质，以已发表的MAR（TM1）和对照，对4个新MARs序列进行体外结合实验，结果表明TM2和TM3与核基质的结合能力强于已知MAR序列。将4个新MARs和对照分别顺向构建和表达载体pBI121 gus基因表达盒两侧，用农杆菌介导法转化烟草，获得转基因植株。对转基因植株体内GUS酶活性检测表明，TM1，TM2，TM3和AM1均能命名外源基因表达增强，其中TM2增强5倍，TM1增强1．5倍，TM2增强效果强于对照TM1。表明分离到一个新的强MAR，可以用于高效表达载体的构建。对5个MARs的序列特征、体外结合能力及外源基因表达影响三者之间的关系进行了分析，并对获得的强MAR在植物基因工程中的应用进行了讨论。     

6个植物MARs序列的ARS功能鉴定与分析

利用酵母表达系统, 对来自烟草和拟南芥的6个植物MARs序列分别进行了ARS功能鉴定. 结果表明, 在酵母细胞内, TM1和AM4有强的自主复制功能, 其活性与来自酵母染色体的ARS相当, 其他4个植物MARs序列无ARS活性. 为了进一步分析植物MAR序列中ARS的活性区, 利用PCR方法对TM1和AM4进行亚克隆, 相应的亚克隆分别命名为TM1-1, TM1-2, TM1-3, AM4-1, AM4-2和AM4-3. 实验发现, TM1-3和AM4-3不仅具有比完整MARs更高的ARS活性, 而且在酵母转化效率、转化稳定性及生长速度方面也优于完整片段. 本研究结果为阐明MAR的作用机制与自主复制功能的关系提供了重要线索.