基于微生物筛选技术的抗生素残留检测试剂盒及方法

“基于微生物筛选技术的抗生素残留检测试剂盒及方法”由福建出入境检验检疫相关单位的检验检疫技术中心和福州美斯特生物技术有限公司联合完成。     

变性高效液相色谱检测霍乱弧菌

变性高效液相色谱（DHPLC）是近几年刚发展起来的一种快速检测PCR扩增产物的新技术．应用该技术快速检测O1、O139、非O1、非O139群霍乱弧菌的外膜蛋白基因（ompW）．根据霍乱弧菌外膜蛋白基因的特异性引物,PCR扩增的产物经DHPLC进行快速检测．以54株参考菌株做特异性检测．在丹东口岸国境外环境水体采集水样310份,以PCR—DHPLC和常规分离培养进行了比较,对丹东口岸国境外环境水体霍乱弧菌感染状况进行了检测,并对分离株进行了ompW基因测序．试验结果表明该方法有很好的特异性,310份水样中经PCR—DHPLC检测出58株霍乱弧菌的分菌株,阳性率为19％,与常规分离培养比较,符合率为100％．分离株的ompW序列与Genbank中的存在1％～3％的差异．这种检验方法特异性强,简便快捷,为霍乱防治提供了一种有效的检测新手段．     

临床厌氧菌的分离和鉴定

本实验从60份临床标本中行厌氧菌的分离和鉴定，40份标本分离到厌氧菌，阳性率为67％，其中，牙周病的临床标本厌氧菌的检出率高达100％，阑尾脓肿和腹膜炎标本为935，胆道标本为585，一般都是与兼菌混合感染。在腹部外科临床标本中，与致病有关的主要厌氧菌弱拟杆菌（285）、消化链球菌属（205）和梭菌属（19％）。与口腔牙周炎致病有关的厌氧菌 具核梭杆菌（23％）、产黑色素拟杆菌（175）和二氧化碳噬纤维菌（20％）。从60份临床标本中分离到219株厌氧菌，其中拟杆菌属占42％，消化链球菌属占165，梭菌属占16％，梭杆菌属占11％。厌氧菌鉴定中使用了敏感且简便的微量生化分析法。对厌摒力的代谢产物使用 子色谱和气液相色谱分析。并对两者进行了比较，离子色谱法（）IC）操作`简单基线稳定，能直接注射水培养物，可以推荐到临床检验中去，用以厌氧菌感染症的快速推测性诊断。