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1.
类人弹性蛋白是由VAPGVG六肽重复序列构成的多肽。研究通过全基因合成获得上游引入NcoI和下游引入XhoI限制性内切酶位点的[(VAPGVG)3S]4基因编码序列,通过定向递归连接技术在pMD19-T simple克隆载体中构建[(VAPGVG)3S]32基因编码序列。利用NcoI和XhoI双酶切从重组克隆载体中回收[(VAPGVG)3S]32(ELPs)基因编码序列,在T4 DNA连接酶作用下与NcoI和XhoI双酶切处理的线性化载体DNA分子pET28a(+)重组,重组混合物转化大肠杆菌Top10感受态细胞。从添加有50μg·mL-1卡那霉素的LB平板上随机挑取37℃培养过夜的转化克隆,碱法小量抽提质粒DNA,经酶切及序列测定筛选出序列正确的重组质粒DNA转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。从添加有50μg·mL-1卡那霉素的LB平板上随机挑取37℃培养过夜的转化克隆至新鲜配制的TB液体培养基中,于37℃、200 r·min-1培养至OD600约为0.60 h,添加终浓度为100μg·mL-1的IPTG诱导类人弹性蛋白表达3 h,SDS-PAGE凝胶电泳及Western blotting分析表明,该研究成功构建了类人弹性蛋白原核表达载体,在IPTG诱导作用下以可溶性状态高效表达。灰度扫描分析显示,重组类人弹性蛋白经IPTG诱导表达3 h后,可达宿主细胞可溶性蛋白的28.3%。该工作为以大肠杆菌为表达宿主,大量制备类人弹性蛋白用于生物医学材料奠定了良好的基础。 相似文献
2.
魏琪 《海南大学学报(自然科学版)》2003,21(2):113-116
湍流是极为普遍的流动现象,湍流统计模式是目前预测复杂湍流的唯一工具.本文讨论了Navier Stokes方程与湍流的关系,分析了湍流统计模式的局限性,认为一个好的湍流统计模式应当包含尽可能多的湍流脉动结构信息. 相似文献
3.
作者采用生长曲线法衡量不同浓度红花对产纤溶酶菌株C2-13的生长影响;纤维蛋白平板法测量纤溶酶活性;邻二氮菲-Fe^2 氧化法测量羟自由基清除率;乙酸酐直接测定法测量总胆固醇;HPLC法分析发酵产物.结果表明:产纤溶酶菌株C2-13能显著提高红花降血清总胆固醇的功效以及抗羟自由基氧化的能力;一定浓度红花的加入对C2-13的生长和纤溶酶活性有明显促进作用.HPLC分析还观察到红花经发酵炮制后,其成分发生了改变.说明中药红花与产纤溶酶菌株C2-13可相辅相成,互相促进. 相似文献
4.
魏琪 《江苏理工大学学报(自然科学版)》1996,17(4):28-33
对大高宽比竖环形封闭空腔内自然对汉换热问题进行了数值研究,考虑竖环形空腔内自然对流是符合Boussinesq假定的层流,稳态的二维轴对称流动,在适当Ravleigh数变化范围内,用涡量一流函数方程对该问题进行了 数值模拟,得到了2≤K≤10和A=24的几何参数下竖环形封闭空腔在内管表面为等热流,包壁恒壁温情形的流动模式和换热热规律,并讨论了数值计算结果与实验结果之间的一致和差异。 相似文献
5.
魏琪 《江苏大学学报(自然科学版)》1993,(4)
应用正则摄动方法研究了恒热流加热时半无限大区域内熔化问题,得到了一种近似分析解,所得结果对工程设计具有实用价值。 相似文献
6.
魏琪 《江苏大学学报(自然科学版)》1991,(3)
用广义差分法为非定常一维对流扩散方程建立了一个新的差分格式.分析了此格式的稳定性,指出它是绝对稳定的. 相似文献
7.
柴油机曲轴轴心运动特性的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
为研究载重汽车柴油机的曲轴轴承最小油膜厚度与轴承可靠性的关系,在分析J H0lland轴心轨迹计算模型的基础上,结合我国车用柴油机曲轴运动的特点,建立柴油机曲轴运动的计算模型并编制计算程序.运用该模型对CA6110型柴油机各个主轴承与曲轴轴心运动规律的计算,得到各主轴承在不同转速下的油膜压力图、轴心轨迹图及最小油膜厚度图,并据此对轴承的工作状况进行分析.研究表明,曲轴中间和两端的主轴承较其他轴承运动可靠性差,曲轴运动特性的计算模拟可为轴承主要结构参数的选择及轴承的可靠性分析提供一种理论分析方法。 相似文献
8.
固定化金属螯合亲和膜制备及其性能研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将纤维素滤纸经碱处理,环氧活化,配基偶联和固定化Cu2 后制得了大 孔纤维素亲和膜,检验了亲和膜的流速与负压,等温吸附,保存方法及使用次数等亲和膜性能指标,设计了一种解决金属离子泄漏问题的新方法,得到的结果明显优于传统的凝胶柱,以上结果表明,普通纤维素滤纸可以制成性能优良的亲和膜色谱介质。 相似文献
9.
本文导出了λη+(1-λ)P/P_a 最大时卡诺热机的效率和功率,给出了λη+(1-λ)P/P 最大时η和 P 的关系,并进行了讨论。由此阐述了应用多参数组合的目标函数讨论优化问题是有意义的。 相似文献
10.
为研究桥上纵连板式无砟轨道HRB500钢筋的疲劳特性,对HRB500钢筋标准试件进行对称循环荷载下轴向拉压疲劳试验,得到不同应力水平下HRB500钢筋标准试件的疲劳寿命及其累积失效概率.在此基础上,以相关系数p和Theil不等系数u作为估计精度评价指标,对3种常用的三参数威布尔分布参数估计方法进行对比研究,并用精度最高的灰色预测法对HRB500钢筋标准试件疲劳寿命的威布尔分布参数进行估计,得到不同应力水平下HRB500钢筋疲劳寿命分布函数.最后,基于Kohout-Vêchet方程,建立全应力水平范围内可靠指标为4.2的HRB500钢筋概率S-N曲线.本文的研究成果可为服役期间组合荷载下桥上纵连板式无砟轨道HRB500钢筋疲劳寿命预测模型的建立提供试验依据. 相似文献