人类PIF1蛋白质N-末端多肽的表达纯化和生物学活性研究

解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢，具有重要的生理功能。为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能，我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版，PCR扩增得到PIF1基因5’端含有1～534核苷酸的cDNA序列一PIFAC。在PIF△C的5’端引入六组氨酸标签后插入pET15b表达载体，得到重组质粒pET15-PIF△C。以此重组质粒转化Rosetta TM2（DE3）感受态细胞，使PIFAC蛋白质在大肠杆菌中得到表达。在4℃通过快速液相色谱纯化系统，通过一系列色谱层析柱纯化了PIFAC蛋白质。以纯化的PIFAC蛋白质免疫家兔制备了抗血清，并检测了纯化的PIFAC的生物化学活性。结果显示不含解旋酶模序的人类PIF1蛋白质的N-末端，具有使单链DNA复性的特性。PIF1解螺旋酶具有解开DNA双链和使双链DNA复性这一矛盾的特性，暗示了人类PIF1解螺旋酶可能参与损伤DNA的修复，包括断裂的双链DNA的修复。     

篮球技术系列教学教法改革初探

篮球技术系列教学教法的使用，是上好篮球课的必要手段。选择正确合理的教学方法，可以充分发挥学生的主体作用，启发、激励、引导学生开动脑筋，自觉地进行学习、思考和实践。在掌握技术动作的同时，也能够掌握讲解与示范的方法，从而实现从教会到会教的教学过程。     

构建和谐社会与心理健康

改革越深化、经济越发展，社会生活节奏越加快、矛盾越复杂。要构建社会主义和谐社会，心理健康就越显得重要。当前要充分把握心理健康标准及其重要性，调查研究心理不健康的主要表现，克服心理异常，医治心理疾病，积极促进社会主义和谐社会的构建和发展。     

初中新生入学适应的发展研究

经纵向研究发现：初中新生的入学适应水平并非随时间的推移逐渐提高,而是呈“V”型趋势发展,即由适应——不适应——适应的过程发展,且各维度的适应水平也不平衡．学校和教师应根据新生的入学适应特点和发展规律,适当延长入学教育指导时间,重视入学后第二、三个月的适应指导,对症下药,走出入学适应指导误区。     

人类抗砷相关基因hARRG全长cDNA的克隆和在E.coli中表达

通过对构建的人胎脑cDNA文库进行大规模测序,发现一条人类新基因,序列与仓鼠asr2序列高度同源,达88％,命名为人类抗砷相关基因（human arsenic resistance related gene.hARRG),hARRG与抗砷基因相关序列ARS2（AF082871）几乎完全全同源,仅比它短253bp,hARRG并不是全长基因而仅是一个cDNA片段,为了获得hARRG全长cDNA,运用Northern blot电子RACE和5－SMART－RACE的方法克隆了一条2999bp 的hARRG全长cDNA,通过Unigene染色体定位于7q21.3,经过生物信息学分析发现,该cDNA有完整的读码框,编码一个788个氨基酸的蛋白,预计分子质量为89．2ku,并在大肠杆菌中获得了成功表达。     

类硫氧还蛋白hTRXLⅠ cDNA的克隆和原核表达

从人18周胎脑中抽提mRNA,建立cDNA文库,通过大规模测序克隆出一条人类基因,该基因全长1644bp,开放阅读框1146bp,编码一个含372个氨基酸的蛋白,预测分子质量约为46.8ku.经与蛋白数据库比较,发现具有人硫氧还蛋白结构,命名为人的类硫氧还蛋白基因Ⅰ(human Thioredoxin like geneⅠ,hTRXLⅠ).多组织膜Northern blot结果显示在心脏、脑、胎盘、肝、骨骼肌、肾、胰腺等各个组织中均有表达,肺中表达不明显.通过Unigene染色体定位,将hTRXLⅠ定位于11q11,把hTRXLⅠ的读框克隆入经改造的PBV220质粒中,在E.coli中诱导后获得表达.     

发展社区教育 创建学习型社区

党的十六大报告为发展社区教育 ,创建学习型社区指明了方向。在全面建设小康社会的整个历史过程中 ,发展社区教育 ,创建学习型社区的地位和作用将日益突显 ,它对提高我们的综合国力作用重大 ,是全面建设小康社会的实际步骤 ,要遵循求真、求善、求美、求新和求实的方针不断努力     

发展社区教育 创建学习型社区

党的十六大报告为发展社区教育,创建学习型社区指明了方向。在全面建设小康社会的整个历史过程中,发展社区教育,创建学习型社区的地位和作用将日益突显,它对提高我们的综合国力作用重大,是全面建设小康社会的实际步骤,要遵循求真、求善、求姜、求新和求实的方针不断努力。     

充分发挥教师的主导作用是教学优化的关键

教学优化是教师和学生乃至全社会追求的教育目标之一,要实现教学优化,教师首先必须忠诚党和人民的教育事业,认真贯彻执行教育方针;其次要努力学习专业知识和人类的一切优秀化成果．认真钻研教学内容,选择制定最优的教学方案;第三要以改革创新的教育教学思想为指导,认真地备好课;第四要变“精讲多练”为“精讲巧练”;第五要教会学生学习,培养发展学生的智力,促使其形成良好的个性心理品质．只有这样,才能最终实现教学优化的预期目标．     

人类PIF1蛋白质N-末端多肽的表达纯化和

解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢,具有重要的生理功能.为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1基因5′端含有1～534核苷酸的cDNA序列-PIFΔC.在PIFΔC的 5′端引入六组氨酸标签后插入pET15b表达载体,得到重组质粒pET15-PIFΔC.以此重组质粒转化RosettaTM 2(DE3)感受态细胞,使PIFΔC蛋白质在大肠杆菌中得到表达.在4℃通过快速液相色谱纯化系统,通过一系列色谱层析柱纯化了PIFΔC蛋白质.以纯化的PIFΔC蛋白质免疫家兔制备了抗血清,并检测了纯化的PIFΔC的生物化学活性.结果显示不含解旋酶模序的人类PIF1蛋白质的N-末端,具有使单链DNA复性的特性.PIF1解螺旋酶具有解开DNA双链和使双链DNA复性这一矛盾的特性,暗示了人类PIF1解螺旋酶可能参与损伤DNA的修复,包括断裂的双链DNA的修复.