Jab1基因的RNAi对乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移的影响

为探讨Jab1基因在乳腺癌细胞中的生物学功能,进一步揭示其作用的分子机制.首先在乳腺癌细胞MCF-7中,成功建立了慢病毒介导的Jab1基因的RNAi系统,并通过CCK8细胞增殖实验和细胞划痕实验证实Jab1基因表达的干扰使得MCF-7细胞的增殖和迁移发生显著的下降,细胞周期分析表明,干扰Jab1的表达能增加MCF-7细胞sub G1期的比例,诱导凋亡;此外,通过RT-PCR和Western blot实验首次发现Jab1能调控TBHS1的表达,添加甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC能抑制Jab1表达干扰介导的THBS1表达下调,提示Jab1可通过甲基化的表观遗传学途径调控THBS1基因的表达.     

乳腺癌Jab1蛋白调控Nov基因的表达受甲基化水平影响

为探讨癌基因Jab1在乳腺癌发生发展中的功能,首先在乳腺癌细胞MDA231中建立了慢病毒介导的Jab1基因的表达干扰系统,并通过人基因表达谱芯片分析结果以及实时定量PCR实验筛选出受Jab1调控的下游基因;此外,通过实时定量PCR以及Western blot实验证实Jab1干扰表达能降低Nov基因在转录和翻译水平表达,而且Nov启动子区域存在4个高甲基化CpG位点.进一步使用甲基转移酶抑制剂处理Jab1干扰表达细胞,发现与未使用抑制剂处理细胞相比,Nov基因的mRNA和蛋白质表达水平发生明显上调,说明Jab1基因调控Nov表达受甲基化水平的影响,提示Jab1可能是通过表观遗传学水平调控Nov基因的表达.     

在直拉法尖晶石上外延硅膜的研制

本文叙述了在直拉法生长的尖晶石上外延硅膜的制备与性质。已在直拉法尖晶石 （１００）面衬底上生长出一批电学性能较好的Ｎ型单晶硅膜，并进行了热氧化稳定性试 验，Ｎ型掺杂的硅膜其霍尔迁移率一般在３００厘米２／伏·秒左右．最高达３８０厘米２／伏 ·秒。载流子浓度控制在 １０１５～１０１６／厘米３硅膜厚度在 １—２微米。     

尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达

尾静脉大容量快速注射裸质粒DNA能够介导外源基因在动物肝内高效表达, 采用此方法将人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)表达质粒pCMV-hFⅨ 2.2 mL于7 s内导入小鼠体内, hFⅨ在小鼠体内表达水平最高为2921 ng/mL(血浆). hFⅨ表达水平与裸质粒DNA注射剂量呈正相关, 重复注射的hFⅨ表达水平偏低(最高1459 ng/mL). PCR检测发现小鼠多种器官中存在hFⅨ cDNA, RT-PCR和免疫组化切片检测表明, hFⅨ mRNA和蛋白主要在肝脏中表达. 转氨酶水平与病理切片检测表明, 注射1 d后5%的肝脏细胞受到损伤, 但在3 ~ 10 d内恢复. 研究结果表明, 尾静脉大容量快速注射法能够介导hFⅨ在小鼠体内高水平表达, 为基因治疗研究提供了一项简便而实用的动物实验手段.     

Induction of Apoptosis in Protoplasts and Suspension Cultures of Plant Cells

IntroductionApoptosisisacellularautodestructionprocessfortheactiveeliminationofunwantedcells[1].Apoptosishasbeenobservedinmanyanimaltissuesandwasfoundtoplayavitalroleinnormaldevelopment,maintenanceofhomeostasisandpathologicalprocessesassociatedwithvariousdiseases[2,3].Thereismoreandmoreevidenceshowingthatapoptosisalsooccursinhigherplants[4].However,comparedwiththeresearchinanimals,thestudyofapoptosisinplantsisstillinitsinitialstage.Ourstudyinvestigatestheapoptosis-inducingeffectsofsomeabiotic…     

Analysis of Salicylic Acid Induced Proteins in Rice

ＳｉｎｃｅＷｈｉｔｅｏｂｓｅｒｖｅｄｔｈａｔｓｐｒａｙｉｎｇｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｓｗｉｔｈｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ (ＳＡ)ｏｒａｃｅｔｙｌｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｄｕｃｅｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏｉｎｆｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈｔｏｂａｃｃｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ[1] ,ｍａｎｙｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｈａｖｅｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔＳＡｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ａｃｔｉｎｇａｓａｎｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｓｉｇｎａｌｍｏｌｅｃ…     

植物非细胞凋亡体系的构建

为了研究植物细胞的的凋亡机制,利用热激诱导凋亡的烟草细胞中的胞质溶胶,构建了植物非细胞凋亡体系,温育在此体系中的正常烟草细胞核,出现染色持固缩,形成凋亡小体等典型的细胞凋亡的形态学特征,ＤＮＡ电泳分析观察到核小体间ＤＮＡ断裂所形成的梯状条带,将细胞核进行了彗星电泳观测到彗星状的核ＤＮＡ片段的迁移,抑制剂研究发现ｐｅｐｓｔａｔｉｎＡ,ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ及ＥＤＴＡ均不能抑制上述形态学变化及生化变化,而     

热激诱导烟草悬浮细胞的凋亡

烟草细胞经４８℃处理４ｈ再正常培养可出现典型的细胞凋亡的变化。ＤＮＡ梯状条带检测结果显示,４８℃处理４ｈ的样品,其基因组ＤＮＡ被降解形成明显的ＤＮＡ梯状条带,表明热激诱发了ＤＮＡ的核小体间的断裂,从而表现出典型的凋亡细胞的生化特征,而同样温度处理２和９ｈ的样品虽然仍可观察到ＤＮＡ梯状条带,但远不如处理４ｈ的清晰。对处理４ｈ的样品进行核ＤＮＡ断裂的原位检测,多数细胞显示极强的ＴＵＮＥＬ阳性,表明其细     

正态模型参数的后验分布及其抽样算法

当正态线性模型中的参数取Jeffreys先验分布时,得到了回报系数和误差方差的联合后验分布和边际后验分布,还特别导出了回归系数某种二次型的分布。利用回归系数和误差方差联合后验分布的分解形式,给出了它们的一种抽样方案。     

HSV/AAV嵌合病毒法制备rAAV/hFⅨ及其安全性检测

构建了由CMV启动子调控的人凝血因子Ⅸ小基因的重组腺相关病毒载体, 并通过HSV/AAV杂合辅助病毒的方法大量制备成重组腺相关病毒颗粒(rAAV/hFⅨ). 经Southern dot blot及QC-PCR法测定, 滴度达到3.6 × 10¹² vg(病毒基因组)/mL. 将rAAV/hFⅨ病毒以7.5 × 10¹¹ vg/只直接注射到血友病B小鼠股四头肌中, 检测到人Ⅸ因子最高表达量达到387 ng/mL血浆, 持续表达时间12周. 血浆中产生的抗体情况与表达曲线相吻合. 实验结果表明, 采用HSV/AAV杂合辅助病毒法能够有效解决AAV载体的大量制备问题, QC-PCR法检测重组腺相关病毒的滴度比传统的点杂交法更加快速准确. RT-PCR检测表明重组AAV中没有野生型HSV的污染, PCR检测表明重组AAV注射后, 重组AAV病毒仅存在于注射点附近的肌肉中, 未见扩散.