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为构建登革2型病毒中国分离株(DEN2-43)的反向遗传系统, 根据已测定的DEN2-43全基因组序列, 利用长链RT-PCR及融合PCR扩增此病毒基因组全长cDNA分子, 并将其克隆至低拷贝载体pWSK29中构建该病毒株的全长cDNA克隆. 将此克隆体外转录后, 经电穿孔导入宿主细胞获得恢复病毒. 结果表明, 获得的基因组全长cDNA克隆具有感染性, 所获得的恢复病毒具有与原型病毒类似的生物学性质及乳鼠神经毒力, 且可稳定传代. 该反向遗传系统的构建为深入探讨登革病毒的致病机理及新型疫苗的研制奠定了基础. 相似文献
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衣壳蛋白缺失突变对登革病毒致病性及免疫原性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
在登革2型病毒中国分离株(DEN2—43)的感染性全长cDNA克隆的基础之上,利用融合PCR技术构建衣壳蛋白基因缺失的全长cDNA.将其线性化并体外转录成RNA后,经电穿孔法导入宿主细胞获得缺失突变病毒,对其致病性和免疫原性进行了观察.结果显示,随着衣壳蛋白缺失氨基酸残基数目的增加,病毒在敏感细胞中的增殖能力逐渐减弱,而衣壳蛋白第3个α螺旋序列缺失的突变体则完全丧失感染性.突变病毒对乳鼠的致病性也随之减弱,缺失10个氨基酸残基使病毒几乎完全丧失乳鼠致病力.同时缺失突变病毒可诱导小鼠产生高水平IgG抗体.表明登革病毒衣壳蛋白具有功能灵活性,可作为减毒突变的靶位点.该结果为深入探讨登革病毒基因组结构与功能的关系及研制新型登革减毒疫苗奠定了基础. 相似文献
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土坝破坏来源于水和其它外力的侵袭以及土体强度的不足,其中渗流产生的坝体破坏占有较大比例,且造成的后果极为严重。通过对土石坝产生渗流破坏的现象分析,掌握其发展规律,有针对性地提出渗流的控制措施。 相似文献
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针对环境工程专业人才培养的现状及存在的问题,提出了产学研相结合是高等环境工程创新人才培养的新途径.实行产学研相结合教育模式,培养符合社会所需要,具有鲜明工程特点和专业特点的环境工程人才,对克服当前的就业困难局面具有重要意义. 相似文献
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同定总价合同以工程造价易于结算,量与价的风险主要由承包商承担,承包商索赔机会少等特点在目前建筑市场上颇受青睐.笔者结合自己的上作经验,从该类合同的选用范围,招标应该加以约定内容、计价形式选用、支付及结算等方面,就发包方如何科学的运用固定总价合同做一些探讨. 相似文献
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信息化时代,许多行业都选择引用计算机技术,以提高工作效率。计算机技术运用到审计工作也毫不例外使得审计工作效率大大提高,但随之而来的也扩大了审计的风险。审计作为一种对人们从事经济工作的行为进行监督的工作。它的真实性、有效性对整个社会经济乃至社会环境都有着重要的作用。所以,对计算机环境下的审计风险进行控制是提高审计工作社会效应的必然途径。主要通过阐述研究计算机环境下审计风险的必要性,分析风险产生的原因,进一步提出了对计算机风险的控制措施,以求能为降低计算机审计风险做参考,提高审计工作质量。 相似文献