人补体调节蛋白基因MCP和DAF的克隆及其在E. coli中的表达

人膜辅基蛋白MCP(membrane cofactor protein)和降解加速因子DAF(decay-accelerating factor)是免疫排斥反应中补体系统活性调节的重要蛋白．以PCR的方法分别从成人肝cDNA文库和胎儿骨髓cDNA文库中扩增得到MCP和DAF基因，克隆入载体pUC19，再以所构建质粒为模板，以PCR的方式在二基因间加入编码柔性连接肽的DNA序列，构建融合基因MCP-DAF，并克隆入pUCl9质粒．将MCP、DAF及MCP-DAF亚克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a( )或pET-32b( )，构建表达载体MCP-pET32a，DAF-pET32b及MCP-DAF-pET32a，分别导入E．coli BL21菌株中表达，得到预期分子质量大小的蛋白．     

利用小麦5B效应引入外源基因的研究（Ⅰ）易位系的培育

ｄｕｒｕｍ小麦的代换系ｄｉ－ｓｕｂ５Ｄ（５Ｂ）与添加系ｄｉ－ａｄｄｅ４ｔｓ杂交，再用ｄｉ－ｓｕｂ５Ｄ（５Ｂ）进行回交，在自交后代中选育出了易位系１０３２。该易位系染色体数２ｎ＝２８，表现型为非蜡质。这一结果证明了在ｄｕｒｕｍ小麦中也可以利用５Ｂ染色体效应，通过诱发部份同源染色体间的配对，获得易位体。     

利用小麦5B效应引入外源基因的研究：2.易位系1032…

本文对易位系１０３２进行了细胞遗传学分析，通过Ｃ分染显带分析，鉴别出易位染色体为２Ｂ染色体。易位系１０３２与易位系１００４的不同组合的杂交结果也证明了两个易位系中的染色体易位均发生在同一染色体上，但易位系１０３２的易位位置是在２Ｂ染色体的长臂末端。．     

利用小麦5B效应引入外源基因的研究──2．易位系1032的细胞遗传学分析

本文对易位系１０３２进行了细胞遗传学分析。通过Ｃ分染显带分析，鉴别出了易位染色体为２Ｂ染色体。易位系１０３２与易位系１００４的不同组合的杂交结果也证明了两个易位系中的染色体易位均发生在同一染色体上。但易位系１０３２的易位位置是在２Ｂ染色体的长臂末端。     

哺乳动物基因功能研究正引发国际生命科学和生物医药产业的新一轮竞争

人具有46条染色体,包含了约2.4万个编码不同蛋白质的基因以及大量miRNA和基因调控序列。这些基因蕴含的遗传信息不仅决定了人的体貌、代谢、寿命等生理特征,而且对疾病的发生发展具有重要作用。现代生物医学研究表明,基因突变和基因功能异常不仅可以直接导致肿瘤、心脏病等     

抑癌基因p27在肿瘤细胞MCF7中的表达

抑癌基因p27是一个细胞周期依赖性激酶抑制子CKI(CDK inhibitor),对细胞周期起着负调控的作用,将p27基因克隆到表达载体pcDNA,转染到肿瘤细胞MCF7中,筛选到稳定表达株．p27基因的过量表达确实对肿瘤细胞的生长产生了抑制作用,并且引发了部分肿瘤细胞的凋亡．     

水稻染色体微切割及4号染色体酶解片段的扩增

通过细胞分裂的同步化,低渗,酶消化,瞬间固定和涂片等制片技术,快速制备水稻根尖体细胞染色体标本。该方法制备出的染色体标本,杂质少,染色体分散程度好,满足了染色体微切割用片的要求。染色体微切割和ＰＣＲ扩增技术,获得了水稻第４号染色体ＤＮＡ文库。     

灰飞虱共生菌Wolbachia引起的细胞质不亲和性

对我国６个地区和日本３个地区灰飞虱的Ｗｏｌｂａｈｉａ感染率，用ＰＣＲ技术进行了检测，结果表明中国的辽宁、北京、上海和云南的灰飞虱的Ｗｏｌｂａｃｈｉａ感染率均接近１００％；四川为５９．６％；而宁夏为０。各地区灰飞虱间的交配实验证明了在Ｗｏｌｂａｃｈｉａ引起的细胞质不亲和现象的存在，Ｗｏｌｂａｃｈｉａ１６ＳｒＤＮＡ的部分测序分析表明，上海、云南和日本出云的灰飞虱发的同为Ｗｏｌｂａｃｈｉａ ｐｉｐｉｅｎ     

SNF1A转基因果蝇的构建

将质粒GH12596中的果蝇SNF1A cDNA用PCR方法扩增，并与pEGFP-N2质粒中的荧光蛋白CFP编码序列连接入果绳转基因载体pUAST上，构建了UAS-SNF1A-GFP质粒，转入果蝇细胞内，利用mini-white标记基因筛选，得到3个独立的转基因果蝇品系，将这些转基因果蝇品系分别定位平衡，并用单果蝇PCR方法加以佐证，然后将转基因品系分别与eyGAL4，actin-GAL4,pGMR-GAL4等3个GAL4果蝇品系交配，在荧光显微镜下检测到该基因在果蝇中的表达，从而确认了用显微注射技术能够得到稳定的转基因果蝇模型，为开展用果蝇GAL4-UAS系统大规模研究基因功能奠定了基础。     

人类ADAM家族成员ADAM23a的克隆

应用与ADAM家族成员高度同源，来自人胎脑的EST（espressed sequence tag)为探针，从人22周胎脑cDNA文库中分离到3．0kb长的cDNA片段，除了C末端缺少91nt外，与ADAM23同源性达100％，编码的蛋白未能形成明显的跨膜区，定名为ADAM23a，在检测中发现，该基因与ADAM23的C末端相同位置的氨基酸序列中，分析其金属蛋白酶功能域(metalloproteinase domain)，不含有结合Zn的活性位点，去整联蛋白功能域（Disintegrin domain)与ADAM部分成员具有同源性，在人16种组织的Northern blot检测，ADAM23a仅在心脏和脑中表达，由于2种cDNA从不同发育时期的胎脑及脑中分离得到，有可能是在发育过程中受到了调节，可能通过去整联蛋白功能域与脑和心脏中的整联蛋白（integrin)相互作用。