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1.
为了深入了解羧酸酯酶(Carboxylesterase,Car E)基因在烟草甲Lasioderma serricorne生长发育及响应CO_2气调胁迫方面的作用,在转录组测序基础上,利用RT-PCR技术克隆了烟草甲2个Car E基因c DNA全序列,对其分子特性和系统发育进行分析,并利用实时定量PCR技术检测其在不同发育阶段及不同φ(CO_2)气调胁迫条件下的表达模式。获得了烟草甲2个Car E基因完整的开放阅读框,其长度为1 698 bp和1 695 bp,编码565和564个氨基酸。氨基酸同源性和系统进化树分析表明,它们均具有羧酸酯酶典型的保守结构域,且属于β家族,分别命名为Ls Car EB1和Ls Car EB2(Gen Bank登录号:MG189601和MG189602)。Ls Car EB1和Ls Car EB2在烟草甲的各发育阶段均有所表达,其中在高龄幼虫期的表达量较高,显著高于低龄幼虫、蛹和成虫期的表达水平。LC10、LC30和LC503种φ(CO_2)处理6 h后,Ls Car EB1和Ls Car EB2的mRNA表达量随胁迫φ(CO_2)升高而上调且显著高于对照组。推测Ls Car EB1和Ls Car EB2不仅对烟草甲的生长发育具有重要作用,而且是其响应CO_2气调胁迫的重要机制之一。  相似文献   
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本研究采用RT-PCR技术克隆了药材甲热激蛋白60(Heat shock protein 60,Hsp60)基因的cDNA全长序列,命名为SpHsp60(GenBank登录号:KX778623).氨基酸序列分析表明SpHsp60具有Hsp60基因家族高度保守的基序,实时定量PCR技术检测了不同温度胁迫后该基因的表达量,结果表明:-5℃和0℃低温处理2h,药材甲成虫体内的SpHsp60的表达量均显著高于对照组,且42℃高温处理2h后的表达量也显著高于对照组.说明SpHSP60与药材甲应对极端温度胁迫相关.  相似文献   
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