黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合研究

进行了黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合实验 .结果表明 ,将孢子悬浮液接种于种子培养基 ,然后转移到含 0 .5 %Gly的菌丝体培养基收获的菌丝体对形成原生质体最有利 .分别采用 10mg mL、6 0min及 5mg mL、75min的溶菌酶浓度与酶解时间制备黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体能达到较高的形成率和再生率 .采用单亲灭活卡那链霉菌原生质体的种间融合法 ,得到与亲株形态明显不同的杂合体菌落 ,并筛选到44株妥布霉素产率提高的菌株 ,幅度最高达到 39% .     

依纽小单胞菌2-脱氧蟹肌醇合成酶基因的克隆与表达

从伊纽小单孢菌(Micromonospora inyoensis)扩增参与紫苏霉素生物合成的2-脱氧蟹肌醇合成酶基因sisB,并分别将其克隆到筛选载体pUC18和表达载体pET-30a上,其开放阅读框长1 185 bp,编码含394个氨基酸残基(41.94 ku)的多肽链,将pET-sisB转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),使sisB基因实现表达.基因sisB的碱基序列与棘孢小单孢菌(M.echinospora)的基因gntB的碱基序列的同源性高达93%.预测的SisB蛋白序列与GntB蛋白序列的同源性为95.2%.基因sisB是继紫苏霉素抗性基因srm1(AY661430)和参与紫苏霉素生物合成的糖基转移酶基因sisD(DQ250992)和sisZ(DQ250994)后,从依纽小单孢菌克隆到的又一新基因.该基因在GenBank的接受号为DQ250993.     

紫苏霉素抗性基因srm1的克隆及其特性研究

从伊纽小单孢菌（Micromonosporain inyoensis）扩增到包含紫苏霉素抗性基因srm1的DNA序列LY102（847bp）,并将其克隆到pUC19／18载体上．srm1基因是依靠它自身的启动子激活（ATG上游19bp序列）,在E．coli DH5α中表达,并不受lac启动子的控制．其开放性阅读框长819bp,编码含273AA的多肽链预测的Srm1蛋白序列与Gmd3（来自玫瑰小单孢菌）、GrmA（来自绛红色小单孢菌）和Sgm（来自兹昂小单孢菌）的同源性依次为92％,89％和85％．srm1,grmA,grmB和sgm4个抗性基因具有相同的核糖体结合位点GGAGG,但是它们的核糖体结合位点与翻译起始密码子之间的序列互不相同．基因srm1以自阻遏方式在翻译水平上进行调节。     

一株产Herbimycin A单组分吸水链霉菌SH035的研究

从土壤中分离到一株代谢产物具有抗细菌、真菌及抗肿瘤细胞活性的放线菌SH035.用乙酸乙酯萃取SH035发酵液中的活性成分,采用紫外吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及高效液相色谱等分析方法对该活性成分进行分析鉴定;通过形态特征、培养特征、生理生化特征和16SrRNA基因序列分析对菌株SH035进行鉴定.结果表明,该活性成分为Herbimycin A(除莠霉素A),且组分单一;菌株SH035的形态特征、培养特征以及生理生化特征均与吸水链霉菌一致,其16SrRNA基因序列与吸水链霉菌的同源性最相近,初步鉴定其为吸水链霉菌.     

妥布霉素产生菌黑暗链霉菌F_(-211)发酵特性研究

从黑暗链霉菌Ｆ－２１１合成妥布霉素（Ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）的发酵原理出发,研究黑暗链霉菌产生抗生素的特性,考察与生产妥布霉素紧密相关的种龄、周期、关键原料—油,和影响生物合成抗生素的各种主要因素,绘制出合理的发酵工艺控制图,优化发酵条件,使发酵单位提高了近一倍．