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编码普通野生稻磷酸盐转运蛋白基因片段的分离与克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
以云南普通野生稻基因组DNA为模板,根据GeneBank中登记的编码小麦高亲和力磷酸转运蛋白基因保守序列设计一对特异引物,利用多聚酶链反应技术(PCR),扩增出目标基因(cwrpt)1002bp长度的基因片段并克隆到载体pGEM-T。经DIG标记探针杂交检测初筛,限制性内切酶酶切,PCR扩增,DNA序列分析与可能氨基酸序列同源性比较,此推定的氨基酸序列与小麦,水稻,拟南芥,番茄磷酸转运蛋白同源性很高,初步认为此基因片段为普通野生稻耐低磷胁迫相关磷酸盐转运蛋白的编码基因,获得全长序列与基因表达的进一步研究正在进行中。 相似文献
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蝴蝶兰查尔酮合酶基因cDNA的克隆、鉴定及其原核表达 总被引:5,自引:0,他引:5
利用逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)得到在蝴蝶兰花瓣中特异性表达的查尔酮合酶cDNA(pchs-1).DNA序列分析表明,该序列与已发表的查尔酮合酶基因有很高的同源性.将此cDNA序列不改变阅读框架克隆到pET-24α( )原核表达载体上,经IPTG诱导后,SDS-PAGE的结果表明有预测大小的蛋白受诱导表达,该基因在植物中的功能验证工作正在进行中. 相似文献
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不同种群灰飞虱(Laodelphax striatellus)的RAPD分析 总被引:9,自引:0,他引:9
用RAPD技术对9个不同的灰飞虱地理种群的DNA多态性进行了研究。按Neighbor-joining聚类法构建了这9个种群灰飞虱的分子系统树。该系统树分为2簇,簇1包括我国北京、福建、海南、辽宁、四川、上海、云南地区的灰飞虱种群,簇2包括宁夏地区和日本东京地区的2个灰飞虱种群。研究表明,不同地区灰飞虱种群的遗传距离与其地理距离不呈相关性。 相似文献
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从我国发病的玉米材料中提取水稻黑条矮缩病毒,抽提病毒RNA,利用RT-PCR等手段,获得了病毒基因组第九组分(S9)cDNA克隆。序列分析结果表明:S9全长1900bp,含有2个不重叠的ORF,编码蛋白的分子质量分别为39.9,24.2ku,与日本株S9核苷酸序列同源性为89%,与意大利株MRDV S8同源性为86%。 相似文献
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利用噬菌体展示筛选结合水稻条叶枯病毒S蛋白的短肽 总被引:1,自引:0,他引:1
利用噬菌体展示技术在随机7肽库中筛选到结合水稻条叶枯病毒(rice stripe virus ,RSV)病害特异蛋白(stripe disease-specific protein,S蛋白)的6个短肽,并进行了序列测定,ELISA结果表明,6个短肽和S蛋白具有一定的亲和能力,筛选到的短肽对今后S蛋白功能分析、转基因抗RSV和水稻条叶枯病的诊断提供了条件。 相似文献
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水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白基因的克隆、表达及检测 总被引:2,自引:0,他引:2
以水稻(粳稻)cDNA为模板,设计一对特异性引物,获得编码水稻高亲和力磷酸盐转运蛋白基因的全序列,ORF区编码含535个氨基酸的蛋白,具有磷酸盐转运蛋白保守的蛋白激酶C作用位点、N端糖基化位点与酪蛋白激酶Ⅱ作用位点Southern blot分析显示此基因在水稻基因组中具有多个拷贝,与水稻基因组序列分析结果一致Westernblot预测目的基因表达的蛋白大小约为57.7ku.该基因的真核表达研究正在进行中. 相似文献
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NaCl诱导表达的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因克隆及原核表达 总被引:4,自引:0,他引:4
通过RACE技术克隆到盐藻(Dunaliella salina Teod.)果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(DsALDP)的全长cDNA,对其序列分析及在GeneBank中进行同源搜索,发现DsALDP基因属于果糖-1,6-二磷酸醛酶基因家族,其与植物叶绿体果糖-1,6-二磷酸酯缩酶(AldP)基因的一致性为73%-66%。Northern杂交结果及醛缩酶活性分析均表明它角为在盐诱导下特异表达。将DsALDP cDNA构建到pET32a载体上,转入E.coli BL21进行表达分析。IPTG诱导后可以检测到-62ku基因产物大量表达。经不同浓度NaCl处理,表达DsALDP基因产物的细菌耐盐性明显高于对照组。 相似文献