关于乡镇水利技术服务的几点思路

农村水利是农村开展的水利工程建设、管理维护及其它有关水资源方面的工作,包括农村水利工程、水资源和水环境。根据自己多年基层水利工作经验,结合本镇实际情况,针对农村水利面临的形势和问题,对乡镇水利技术服务工作的重点和今后的方向提出思路,并提出针对性措施。     

一种快捷可靠的大肠杆菌重组质粒筛选方法

针对如何大规模地筛选大肠杆菌重组子,将质粒快检和菌落PCR两种方法巧妙地融合,建立一种新的高效快捷的重组质粒筛选方法.该方法不需接种抽取质粒,在转化子长出当天即可筛选到重组质粒.大规模基因克隆表明该方法能够快速、准确地筛选出阳性克隆.     

夹竹桃和链霉菌复合颗粒剂灭螺研究

用夹竹桃(Nerium indium)和紫红链霉菌(Streptomyces violaceoruber)复合颗粒剂进行灭螺实验,并与单独使用夹竹桃灭螺和紫红链霉菌的灭螺效果对照,探讨夹竹桃和链霉菌的协同或拮抗作用.研究结果表明:夹竹桃和紫红链霉菌复合灭螺具有一定协同增效作用.复合颗粒剂在不同温度下对钉螺毒杀效果有较大的差异,在15℃下,钉螺7 d死亡率为64.2%;在25℃下,钉螺7 d死亡率为83.2%;在35℃下,钉螺7 d死亡率49.9为%.     

试析道家思想的整体观

道家思想文化的根本与核心是"道"。"与道为一"是道家最根本的追求。道家教育认识论建立在圆融的宇宙整体观基础之上,追求天人合一、和谐共生,通一而毕、取法自然,智恬交养、心与物齐的至高境界,为构建现代可持续发展的教育提供了智慧的源泉。     

硅胶破碎法抽提真菌染色体DNA

在进行基因组步行PCR克隆真菌木聚糖酶基因的研究中,探索并建立了一套可在普通分子生物学实验室采用的高得率、高质量真菌染色体DNA的抽提方法.采用液氮研磨和硅胶破碎相结合提高染色体DNA得率,采用亚精胺法纯化提高DNA的纯度.抽提的染色体DNA用琼脂糖凝胶电泳、限制酶切、PCR反应及紫外吸收光谱等方法进行了鉴定,结果显示此方法可以获得分子量大、样品纯的染色体DNA,可有效地用于PCR扩增,并能被限制酶有效地消化.     

一株具有羽毛降解活性的益生菌的筛选和应用

利用以羽毛为唯一碳氮源的培养基,从市售的益生菌中分离筛选可高效降解羽毛的菌株,发现菌株HUBM2摇瓶培养7d,可将大部分的羽毛降解.该菌株经16SrDNA测序鉴定是地农芽孢杆菌.为缩短降解周期,利用该菌研究不同羽毛预处理方法对羽毛降解效率的影响,发现用0.02％的NaOH溶液处理15 min的羽毛降解效率最高.用稀碱处理的羽毛为唯一碳氮源,从接种量、培养基2个方面对HUBM2降解羽毛的条件进行优化,经过优化后,羽毛降解周期从7d减少到2d,羽毛降解率达到80％.测定降解产物中小肽和益生菌的含量,结果显示,发酵液中益生菌含量为1.4×109 CFU/mL,小肽和氨基酸含量为0.41 mg/mL.     

SUMO融合表达对淀粉酶N-Amy活性的影响

前期解析了一个来自嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的新型的碱性淀粉酶Amy703,该酶含有一个未知功能的N端结构域,将该结构域缺失后得到的突变体N-Amy相对野生型Amy703比酶活提高了35倍;底物结合实验显示Amy703可以结合不可溶性底物,单独的N端结构域和N端结构域缺失突变体N-Amy都不能结合,推测N端结构域会造成催化结构域的结构变化从而引起比酶活的大幅提高.为了进一步探究Amy703特异的N端结构域造成酶活显著下降的原因,将Amy703的N端结构域替换为SUMO蛋白,实验结果显示裂解液上清的SUMO/N-Amy条带比Amy703粗亮,验证了SUMO蛋白的促可溶性作用;但纯化后的融合蛋白SUMO/N-Amy的比酶活显著低于N-Amy,仅和野生型Amy703的比酶活相当,表明SUMO与N-Amy的融合显著降低了酶活,同时也预示着N端多一段结构域会影响到催化结构域的结构变化.此外,对SUMO/N-Amy融合蛋白是否与底物结合进行了探讨,为进一步解析Amy703的N端结构域功能提供了实验依据.     

交联木聚糖制备工艺的优化和活性检测研究

交联木聚糖RBB-xylan是木聚糖酶在测定和筛选过程中常用的人工合成的色原底物,利用木聚糖和雷玛唑亮蓝制备RBB-xylan的传统方法得率较低.在传统方法的基础上采用改变单一变量对原有的实验方法逐步改进:将硫酸钠的滴加流速调整为0.8 m L/s,增加1 h陈化时间,将沉淀剂乙醇的用量提高3倍,从而使RBB-xylan得率从原来的50.5%提高到84.8%,效果显著.将RBB-xylan添加到平板可快速筛选出产木聚糖酶的菌株.结果表明,合成的RBB-xylan具有活性,可用于后续木聚糖酶的筛选及活性测定.     

襄阳孔明菜卤水中耐盐污染菌的分离与鉴定

襄阳孔明菜是在高盐下腌制的一种腌菜,在大规模露天腌制过程中,由于雨水污染等原因会在卤水表面长白色菌膜,导致孔明菜的软化,影响口感．从襄阳孔明菜卤水污染物中分离污染菌并进行鉴定,旨在对防控该污染菌奠定基础．将污染菌膜接种于不同浓度梯度氯化钠的YPD固体培养基上,分别在28℃与37℃培养3d后,从28℃分离到一种耐盐酵母,单菌落呈圆形、乳白色,3d培养直径为0．1～0．2cm,表面湿润、粘稠、易挑起．对该菌的进一步研究显示,该菌可以在含有0％～15％NaCl的YPD培养基中生长,最适生长盐浓度为5％;最适生长温度为28℃,可以在pH值5．5～6．5之间生长,最适生长pH值为6．0．抽提该菌的总DNA,扩增部分18SrDNA片段,测序后进行同源比对,结果显示,该耐盐酵母的18SrDNA序列和Zygosaccharomyces rouxii DoNor8、IFO0510、M2的18SrDNA序列一致性达到100％,根据clustal X和MEGA 4．1建构的系统进化树进行分析,该酵母与Z．rouxii在同一分支上,再结合形态和生理特征,认定分离的嗜盐酵母是Zygosaccharomyces rouxii．该菌的分离和鉴定为研究腌制食品中污染菌的防控有一定意义．     

南昌链霉菌与放线菌噬菌体ΦC31相互关系的研究

经点滴法和平板法检测,放线菌噬菌体ΦC31及大部分衍生噬菌体能感染南昌链霉菌,但这些噬菌体的DNA却不能南昌链霉菌。通过比较来自不同宿主的KC515噬菌体悬液对为铅青链霉菌和南昌链霉菌的侵染效率,发现南昌链霉菌对ΦC31及衍生噬菌体具有很强的限制性。Southern杂交实验表明,ΦC31衍生噬菌体KC301（C^ attP^ ）可以整合到南昌链霉菌NS－32－26的染色体上形成溶源,其溶源菌自发释放KC301,但热激诱导后并没有提高释放频率。通过脉冲电泳技术和Southern杂交的方法定位了KC301在南昌链霉菌NS－32－26染色体上形成溶源的附着位点（attB)。这些结果均有利于利用以ΦC31为基础的载体对南昌链霉菌进行分子生物学的研究。