一个绿色荧光蛋白K79R突变gfp基因的鉴定与表达

在开展蓝色荧光蛋白基因bfp的克隆表达研究中,发现一个发强绿色荧光的大肠杆菌突变株,从中提取质粒命名为pHN122.经酶切鉴定、亚克隆和序列分析测定结果证实其上含有一个bfp和一个发生了K79R突变的gfp基因.光谱分析结果表明:GFPK79R的光谱特性虽与野生型gfp相同,但其发光强度提高了1.25～2.44倍.     

华癸中生根瘤茵脂多糖突变株的共生能力

通过植物盆栽实验,对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)lpsH基因的缺失突变株HK241进行共生能力研究.结果表明:突变株HK241形成的根瘤没有固氮能力,同时具有较低的结瘤效率和竞争结瘤能力.因此,lpsH基因参与编码脂多糖的合成,并且在共生中发挥非常重要的作用.     

华癸中生根瘤菌脂多糖突变株的共生能力

通过植物盆栽实验,对华癸中生根瘤菌（Mesorhizoblum huakuii）lpsH基因的缺失突变株HK241进行共生能力研究．结果表明：突变株HK241形成的根瘤没有固氮能力,同时具有较低的结瘤效率和竞争结瘤能力．因此,lpsH基因参与编码脂多糖的合成,并且在共生中发挥非常重要的作用．     

紫云英参与共生固氮的2个新结瘤素基因的分离与鉴定

通过抑制差减杂交, 比较了接种华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii) 7653R的紫云英(Astragalus sinicus)的根与未接种根瘤菌的对照根在转录水平上的差异, 建立了紫云英共生结瘤过程中的差异表达基因文库, 并在此基础上证实了2个结瘤特异性基因AsⅡC259和AsG2511. 其可读框显示, AsⅡC259和AsG2511编码的多肽链长度分别为134和58个氨基酸, 其氨基端均含有一个信号肽. 结构域查询结果揭示, AsⅡC259编码的多肽链包含了2个N-糖基化位点、一个依赖于cAMP的蛋白激酶(PKA)和cGMP依赖的蛋白激酶(PKG)磷酸化位点以及一个酪蛋白激酶Ⅱ(CK2)磷酸化位点. BlastP同源搜索表明, AsⅡC259多肽链仅与一个来自羽扇豆(Lupinus luteus)根瘤的新结瘤素蛋白表现出较低的同源性. 对于AsG2511多肽链, 没有发现任何明显的同源序列. Virtual Northern blot和半定量RT-PCR分析表明, AsⅡC259和 AsG2511均只在接种根中表达, 说明它们确为结瘤特异性基因; 另外, 这2个基因的表达比豆血红蛋白基因晚2~4 d, 应为晚期结瘤素基因.