丙酸盐引起麦白霉素生产菌株生长与代谢的改变

通过在培养基中添加一定质量浓度的丙酸盐,研究其对麦白霉素合成的影响。在发酵培养基中添加质量浓度为6×10-4g/mL的丙酸盐,不但能使麦白霉素的生物效价提高35.2%,而且能提高其组分中麦迪霉素A1的含量,但是添加丙酸盐对菌体的生长不利。发酵12 h添加丙酸盐,产物的合成受到相当大的抑制,且出现二次生长现象,最终菌浓比对照高出40%。发酵12 h添加丙酸盐对麦白霉素生产菌的影响可能是提高了生长代谢的通量,从而使代谢的产物合成通量降低。     

Arthrobacter globiformis酯酶基因的克隆、表达和酶活性测定

采用聚合酶链反应(PCR)的方法扩增了A rthrobacter g lobiform is中酯酶编码基因,与载体质粒连接后在大肠杆菌BL 21(DE 3)中进行表达。以包涵体形式表达的蛋白在8 m o l/L尿素作用下溶解,经过透析复性后获得了具有活性的粗蛋白。产物活性实验表明,酯酶表现出较高的催化活性,为菊酯作为杀虫剂的应用奠定了基础。     

正丙醇、铜离子、烟酰胺对红霉素合成的作用

在摇瓶培养过程中，发酵初期加入正丙醇可使红霉素的效价提高49．31％，正丙醇提高了丙酸激酶的比活力，表现出对该酶诱导作用，而对丙酰CoA合成酶比活力无影响。加入铜离子和烟酰胺可使红霉素效价分别提高24％和179／5。用HPLC测定发酵液中有机酸含量，分析测定结果认为发酵过程可分为3个阶段：积累期、转折期和生产期。     

异亮氨酸对他克莫司发酵的影响

研究了前体氨基酸对发酵合成他克莫司的影响,结果显示:在发酵初期添加2.5 g/L的异亮氨酸(Ile),他克莫司产量提高约59%。有机酸分析和丙酰CoA合成酶与丙酰激酶活性测定的结果显示:异亮氨酸的加入显著增加了丙酸(Pro)的浓度,在产物合成期丙酰CoA合成酶的最大酶活提高到600 U/g。由此表明该前体氨基酸促进他克莫司发酵合成的原因可能是其促进了丙酰CoA等前体物质的合成,从而增进了内酯环的形成。     

螺旋霉素产生菌抗噬菌体菌株的选育

用Ｃｏ＾６０处理螺旋霉素产生菌ＰＳ，获得了一株抗噬菌体且摇瓶发酵单位比原菌株稍高的突变株Ｒ１０，继而对Ｒ１０进行理性化筛选，在加有２－脱氧葡萄糖的分离培养基上分离到一株抗噬菌体稳定、摇瓶发酵单位又比Ｒ１０高２０％的新突变株，且其摇瓶发酵周期缩短１２ｈ、能耐受更高浓度的自身代谢产物－螺旋霉素。     

林肯链霉菌原生质体形成、再生和融合的研究

林肯链霉菌生长在0.5%甘氨酸的S培养基中,能较好地被溶菌酶破壁形成原生质体。原生质体能在RB培养基上再生,但不能在R_2培养基上再生,这和已报道过的其他链霉菌不同。78-11菌株的再生频率约为25.7%,S-3菌株的再生频率约为20.5%。PEG(聚乙二醇)1000对诱导融合的效果较好,重组频率最高可达10~(-2)。重组子和亲本在培养特性、孢子形态方面无特殊差异,但经C_O~(60)诱变后重组子的正变率超过亲本。