癫痫患者额叶脑组织A型GABA受体α1亚型基因表达定量研究

目的: 研究A型GABA受体?1亚型(GABRA1)在癫痫患者病灶额叶脑组织中的表达变化与癫痫发病机制的关系. 方法采用TaqMan探针荧光定量PCR检测GABRA1在癫痫患者病灶额叶脑组织及对照组额叶脑组织中的表达量的差异. 结果对照组及癫痫患者额叶GABRA1平均相对表达强度为3.785±1.444和4.399±2.89, 两者间无显著差异(P> 0.05). 结论额叶脑组织中GABAA受体与癫痫的发生没有相关性.     

SCN1A基因4号外显子突变筛选

目的：探讨癫痫人群及正常人群SCN1A基因突变情况．方法：共采集癫痫病人血液181份、癫痫病人脑组织38份，正常人血液120份．提取基因组DNA，针对SCN1A基因4号外显子设计1对引物，进行聚合酶链反应（PCR）扩增，琼脂糖凝胶电泳，选取适合条件的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，进行单链构象多态性分析，对个别PCR产物进行双向测序．结果：所有样本进行SCN1A的4号外显子筛选时，均未发现异常带出现．选取2例癫痫病人血液的PCR产物测序结果与基因组序列相比对，也未发现碱基改变．结论：癫痫是一种复杂综合征，研究的339癫痫患者中未发现SCN1A基因4号外显子突变．     

中国特发性癫痫患者CLCN2基因第18号外显子SNP检测

选取中国196例特发性癫痫患者为研究对象, 以162位年龄匹配的非癫痫正常人群做对照, 利用PCR-SSCP 技术检测电压门控氯通道CLCN2基因第18号外显子的单核苷酸多态性(SNP), PCR产物测序结果显示该人群CLCN2基因第18号外显子基因型只有一种纯合型, 未发现SNP位点. 结论:对于中国人群, CLCN2基因第18号外显子与特发性癫痫关系不是十分密切. 再结合E. Stogmann对CLCN2基因多态与癫痫关系研究的结果, 初步推断CLCN2基因第18号外显子多态与特发性癫痫无显著相关性. 这对特发性癫痫分子机制得研究有一定帮助.     

人GABRA1实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立

根据GenBank上人GABRA1基因的序列,设计并合成特异性的引物及探针,采用TaqMan探针法建立了荧光定量PCR法,以常规PCR产物为标准品,建立标准曲线．结果表明,标准曲线Ct值检测范围为12．07-32．72,相关系数为0．999,扩增效率为96．4%.建立的GABRA1TaqMan探针实时荧光定量方法具有线性范围广、扩增效率高、检测时间短、敏感性高等特点．