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1.
磁场影响固定化葡萄糖异构酶活性的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用丹麦Novo公司测固定化葡萄糖异构酶 (SweetzymeT)活力的反应体系 ,用半胱氨酸 -咔唑法评价酶的活性 ,研究了磁场在不同条件下对酶活力的影响。实验发现 :在不同磁化时间、温度、磁场强度和pH条件下磁化底物 ,使其活性增加可达 2 8 6 % ,并且具有可逆性 ,但磁化固定化酶或磁场作用于酶—底物反应体系 ,未见酶活力的明显变化。  相似文献   
2.
将Cu,Zn-SOD与抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因(ScFvgene)融合,重组到含T7启动子的表达载体p ET-22b(+)中,构建表达质粒pETSOD-ScFv,并转化大肠杆菌BL21(ED3),进行了高效表达,表达物占菌体可溶性总蛋白的18%。SDS-PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物相对分子质量为41kD,与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在磊肠杆菌中为分泌型表达,有利于纯化。RIA测定表明产物能特异性地与抗原CEA结合,邻苯三酚法测定也表明产物具有SOD酶的活性,该融合蛋白为分泌CEA肿瘤的靶向性治疗及放疗、化疗后的恢复提供新的途径。  相似文献   
3.
以羧甲基纤维素钠(CMC)为底物评价纤维素酶的活性,研究了不同条件下静磁场对酶的活性及构象的影响。9℃,pH4.0条件下磁化,其活性及荧光光谱均不同明显变化;但若改变反应时的pH,可使活性增加达16.4%;并发现磁处理后的酶有滞后效应及可逆性,较高温度下,磁化处理酶液,其活性及构橡均发生不同程度的变化,且对其抑制动力学 混合型抑制模式;其构象变化也基本上随失活的增加荧光强度增大。  相似文献   
4.
磁场对酶构象的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
用荧光光谱法研究了在不同磁场强度、温度、介质和磁化时间下,磁场对乳酸脱氨酶、肌酸激酶、尿酶、超氧化物歧化酶构象的影响。发现磁场能影响酶的构象,但光谱变化与酶活力变化无一定规律,并对其可能的作用机制和原因作了初步探讨。  相似文献   
5.
磁场对大肠杆菌及胞内谷氨酸脱羧酶的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
研制了大肠杆菌电极 ,采用部分干燥法处理大肠杆菌膜 ,使电极寿命达到了 38d 用此电极研究分别磁化底物及大肠杆菌膜对其胞内谷氨酸脱羧酶 (GAD)活性的影响 ,发现在不同磁场强度、不同作用时间下 ,磁化底物其影响不一致 ,活性最高可达 4 5 2 % ,且有滞后和恢复效应 ;磁物菌体膜未见膜活性显著变化 磁场处理菌液 ,未见明显灭菌作用 ,也未见对其生长有显著影响  相似文献   
6.
将编码人胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)成熟肽的cDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a( )中构建表达质粒pET-EC-SOD,表达菌株用1mmol/L异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达3h-5h后,产生较多的重组人EC-SOD,并形成包含体。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白质的26%以上。经纯化和复性后的EC-SOD比活为每毫克纯化酶蛋白1200U。将EC-SOD转染粉纹夜蛾Tn-5Bl-4细胞,经扩增后在细胞内进行表达。SOS-PAGE分析结果表明,粉纹夜蛾细胞中表达一相对分子质量约为28ku的特异蛋白质带,Western blot分析表明,该特异条带即为EC-SOD蛋白,连苯三酚自氧化法测得表达产物比活为每毫克细胞裂解物260U。  相似文献   
7.
磁场对碳酸酐酶的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
建立了流动注射分析方法 ,评价了碳酸酐酶 (CA)的活性 ,并用此方法研究了磁场对酶催化活性的影响。发现磁场作用使酶活力升高 ,2 10mT下作用 4h ,其活力增加了 17% ;随着磁化时间的延长 ,其磁场效应基本上趋于一致 ,且观察到了磁酶效应的可逆性。实验还发现磁场使酶 -底物反应的活化能降低 ,并对可能机理作了初步探讨。  相似文献   
8.
磁场对纤维素酶的活性及构象的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
以羧甲基纤维素钠(CMC)为底物评价纤维素酶的活性,研究了不同条件下静磁场对酶的活性及构象的影响。9℃,pH4.0条件下磁化,其活性及荧光光谱均不见明显变化;但若改变反应时的pH,可使活性增加达16.4%;并发现磁处理后的酶有滞后效应及可逆性。较高温度下,磁化处理酶液,其活性及构橡均发生不同程度的变化,且对其抑制动力学表现为混合型抑制模式;其构象变化也基本上随失活的增加荧光强度增大。  相似文献   
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