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采用SDS方法纯化高粱总DNA,通过化粉管通道将高粱DNA转化P138、丹改340、7922、06NY-2、组3等5个品种的玉米自交系,后代的玉米种子经随机筛选后在实验室盆栽得到幼苗.使用不同序列的59条RAPD引物,对高粱基因组DNA和导入前后的玉米基因组总DNA进行PCR扩增.结果表明,其中9条引物在后代玉米和玉米原种之间具有RAPD差异,并证明了高粱DNA导入了4个玉米自交系,为今后的玉米自交系花粉管导入法育种的分子检验奠定了基础. 相似文献
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优化感受态细胞制备方法提高转化效率的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
通过研究不同生长状态、处理溶液、保存时间及热激时间对感受态细胞制备的影响,分析了影响大肠杆菌株JM109和DH5α感受态细胞形成因素,优化了制备感受态细胞的方法.结果表明,OD600为0.43的大肠杆菌菌液经处理液(20 mmol/L MgCl2 + 80 mmol/L CaCl2)处理,-85℃放置12~14 h,42℃热激处理90 s,转化效率最高,可达5.5×105~6×105 cfu/μg DNA(pSilencer2.1-U6-neo),随着质粒放置时间增加,转化效率下降. 相似文献
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