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香蕉束顶病毒的分离与提纯 总被引:1,自引:1,他引:0
香蕉束顶病毒的分离与提纯@曹先维@孟清@李宝庆@张鹤龄@孙茂林¥华南农业大学园艺系¥内蒙古大学生物学系¥云南省农科院植物保护研究所香蕉束顶病毒,分离,提纯香蕉束顶病毒的分离与提纯曹先维1,孟清2,李宝庆1,张鹤龄2,孙茂林3(1.华南农业大学园艺系,51... 相似文献
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应用Digoxigenin标记的cDNA探针检测香蕉束顶病毒 总被引:3,自引:0,他引:3
用非放射性的Digoxigenin标记的11-dUTP取代32P标记的dATP或dCTP,标记克隆的BBTVcDNA-10.5kbcDNA,制备成探针.通过核酸斑点杂交对粗提取的BBTV,BBTV-DNA,感染BBTV的香蕉植物的拟茎,球茎处的组织,新生叶片以及成熟后的叶片进行了检测.结果表明:BBTVcDNA-1cDNA探针特异性强,不与CMV—RNA、无毒香蕉组培苗提取的核酸发生杂交反应;仅与粗提BBTV、BBTV-DNA、BBTV侵染的香蕉组织的核酸提取物发生杂交反应.此探针灵敏度高,可检出含有BBTVcDNA-10.5kb的质粒DNA的最小量为10pg;测定感病香蕉植株的拟茎汁液的最高稀释度可达1∶128,相当于0.4mg病蕉组织中的病毒含量.测定同一病株不同部位的结果表明,BBTV在植物体内的分布不均匀,拟茎处组织中病毒含量最高,球茎处的组织以及新生叶片中的病毒含量次之,成熟后的叶片中的病毒含量最低 相似文献
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用~(32)P标记的互补DNA探针进行分子杂交是基因重组和分子克隆中常用技术,然而由于~(32)P的半衰期短,从而为供应和保存带来不便,致使这一技术的应用受到一定限制。近年来国内外均十分重视研究应用非同位素标记DNA探针的技术。我们用Biotin—11—dUTP(Bethesda Research Laboratories)以缺口平移(Nick translation)标记了pST-B14和pST-B5 DNA中的PSTV cDNA插入顺序,制备出生物素标记的DNA 相似文献
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