表达EIAV Gag蛋白的DNA载体与重组痘苗病毒联合免疫效果的观察

将中国马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗及其亲本株的gag基因通过同源重组插入到痘苗病毒天坛株的TK区, 经蓝白斑筛选获得重组痘苗病毒rvv-DLVgag和rvv-LNgag. Western blot检测可知重组痘苗病毒能够有效表达完整的EIAV Gag蛋白. 使用本实验室构建的表达EIAV DLV和LN Gag蛋白的DNA载体单独或与表达相应蛋白的重组痘苗病毒联合免疫小鼠, 结果表明各免疫组小鼠体内均产生了针对EIAV的特异性体液和细胞免疫应答. 统计学分析显示, 联合免疫组与单独免疫组相比, 诱导的特异性结合抗体滴度无显著性变化, 而淋巴细胞增殖应答和CTL水平则显著增强, CTL杀伤率最高可达31%, DLV Gag蛋白与LN Gag蛋白诱导的免疫应答强度无显著性差异. 研究结果有助于阐明我国按照传统路线研制成功的EIAV弱毒疫苗的免疫机制, 并为EIAV基因工程疫苗的开发研制奠定基础.     

嗜热脂肪芽孢杆菌YN8674热杆菌素产生条件和过程

采用多因子正交试验方法，确定了一组ＹＮ８６７４热杆菌产生的优化组全培养基，发现培养其中的碳源和无机盐对热杆素菌ＹＮ８６７４产量影响最大，通过对热杆菌素ＹＮ８６７４产生研究，发现热杆菌素产生的最适培养温度是６０℃，最适初始ＰＨ是６．５，而菌体生长的最适培养温度是６５℃，最适初始ＰＨ是７．０热杆菌素ＹＮ８６７４是在菌体生长到对数期中期开始产生，与菌体的生长、发酵液ＰＨ的变化密切相关。     

滑块联轴器及其应用的运动学问题

用机构学原理，建立了滑块联轴器及其应用时的运动学模型，分析了其产生的位移、速度、加速度和惯性力等运动学问题，并推导出相应的计算公式．为滑块联轴器的应用与改进提出了必要的理论依据．     

热杆菌素YN8674的初步纯化和部分理化性质

采用离心、过滤、浓缩、葡聚糖凝胶柱层析等方法对热杆菌素ＹＮ８６７４进行了初步纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测初步纯化样品还有两条谱带。研究了初步纯化样品对热、４℃贮存期、ｐＨ和用五种酶处理后的剩余活性,结果表明,热杆菌素ＹＮ８６７４是一种极其稳定的抑菌物质,经１２１℃、１５磅高温高压处理３０ｍｉｎ后还残存３．１％的活力,抑菌圈仍清晰可见;４℃冰箱中贮存６０ｄ,其活性几乎不受损失;经核糖核酶、纤维素酶     

牛泡沫病毒内部启动子上顺式作用元件

以牛泡沫病毒(bovine foamy virus, BFV)中国毒株BFV₃₀₂₆为材料, 研究env基因内部启动子(internal promoter, IP)上顺式作用元件的功能特点. 用PCR方法进行系列缺失, 将IP中BFV反式激活因子Tas应答元件(TRE^IP)精确定位于TATA盒近上游的72 bp区段中(9205 ~ 9276). 发现此段可激活同源及异源启动子, 具有典型增强子特性; 此区段与已知SFV-1 TRE^IP近启动子区和SFV-3 TRE^IP序列同源性高, 都具有核因子NF-1(nuclear factor 1)的结合位点, 位置相同, 推测此类顺式作用元件具有相似功能特点.     

BHIVgag—pol基因在MT—4细胞中的表达

以HIV－1 HXBc2毒株为遗传背景,通过DNA重组技术构建出嵌合有BIV R29gag-pol基因的重组病毒BHIV cDNA。BHIV cDNA经电转染导入人源细胞MT－4后,分别收集第1d到第7d的细胞和培养液上清进行检测。RT－PCR分析证实BHIV的gag基因已得到转录;反转录酶活性测定表明,BHIV中源于BIV的反转录酶已得到正确转录、翻译并加工成熟。这些结果说明重组病毒BHIV cDNA中HIV控制下的BIVgag-pol基因能够的MT－4细胞内正确表达。     

牛泡沫病毒内部启动子上顺式作用元件具有增强子特性

以牛泡沫病毒（bovine foamy virus,BFV)中国毒株BFV3026为材料，研究env基因内部启动子（internal promoter,IP)上顺式作用元件的功能特点，用PCT方法进行系列缺失，将IP中BFV反式激活因子Tas 应答元件（TRE^IP）精确定位于TATA盒近上游的72bp区段中（9205－9276）。发现此段可激活同源及异源启动子，具有典型增强子特性；此区段与已知SFV－1 TRE^IP近启动子区和SFV－3TRE^IP近启动子区和SFV－3TRE^IP序列同源性高，都具有核因子NF－1（nuclear factor1）的结合位点, 位置相同，推测此类顺式作用元件具有相似功能特点。