两步亲和层析纯化限制性核酸内切酶Bsp 63Ⅰ

以Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ６３为材料,采用ＤＮＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ和ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅＦ３ＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ两步亲和层析,分离纯化得到电泳均一纯限制性核酸内切酶Ｂｓｐ６３Ⅰ。酶的得率约为１３０单位／ｇ湿菌,比活力高达６１４００单位／ｍｇ蛋白。还报道了ＤＮＡ－Ｓｐｅｈａｒｏｓｅ４Ｂ两种亲和吸附剂制作方法的改进。     

限制性内切酶Bsp78I的化学修饰与动力学研究

从Ｂａｃｉｌｕｓｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ７８菌中将Ｂｓｐ７８Ｉ纯化到均一程度。测得该酶对ｐＢＲ３２２ＤＮＡ的Ｋｍ值为２．６７×１０＾－８ｍｏｌ．Ｌ＾－１。用对氯汞苯甲酸、磷酸吡哆醛、２，３－丁二酮修饰该酶巯基、赖氨酸、精氨酸残基，结果表明这些基因均与该酶活性有关。