MALDI-TOF质谱技术研究海兔卵产卵激素及其分解产物的特性

采用萃取法和反相HPLC技术分离蓝斑背肛海兔（Notarcus leachii cirrosus Stimpson，NLCS）卵内的产卵激素（egglaying hormone，ELH）及其分解产物．选用基质辅助激光解吸离子化飞行时间（Matrix-assisted laser deposition／ionization time-of-flight，MALDI）质谱技术研究NLCS卵内的ELH、ELH分解产物和酸性多肽（acidicpeptide，AP）二聚体的组成与结构特性．实验结果表明，NLCS卵不仅含有丰富的ELH及其分解产物，而且它的AP及其分解产物主要呈二聚体状态，推测这种二聚体结构对今后阐明ELH和AP的生理功能和调控机理起着重要的作用．     

魟鱼肝铁蛋白释放铁的动力学研究

选用鱼肝为研究材料,在混合蛋白质体系下,研究鱼铁蛋白(LiverferritinofDasyatisakajei,DALF)释放铁的动力学过程和规律.实验结果表明,在混合蛋白质体系中,以抗坏血酸为电子供体的条件下,DALF以简单的1级反应动力学方式进行释放铁的反应;而采用Na2S2O4为电子供体时,DALF却以两相行为进行释放铁的反应,两相转折点时间约在22min.在体外,不同等电点的DALF释放铁的速率有些差别.因此,作者认为铁蛋白释放铁的过程均受到蛋白壳自身柔性调节速率的影响.     

HPLC和MALDI-TOF质谱技术研究海兔口腔神经节多肽组分与分布

蓝斑背肛海兔中枢神经系统相比于其他海兔,缺少脏神经节. 口腔神经节是蓝斑背肛海兔的主要神经节之一,它控制着口腔和其他附属器官的生理活动,其中多肽起着重要的作用. 本文选用反相高效液相色谱和质谱非在线联用技术分析口腔神经节多肽组成与分布情况,发现口腔神经节含有丰富的神经活性多肽组分,以颊肽、肌肉调节素、心脏活性小肽、肌动蛋白片段和吸引素为主.经Paws软件和数据库检索分析后,发现部分多肽组成来自于前体蛋白的酶解产物,认为这些酶解产物与其他多肽一同参与执行口腔神经节各种不同的生理功能.     

提取与分离方法影响海兔口腔神经节蛋白质组的分离效果

选用丙酮沉淀法和直接裂解法分别提取离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosus Stimpson, NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)全蛋白质,发现采用直接裂解法所获得BG蛋白质种类多于丙酮沉淀法.在第一向等电聚焦电泳 (IEF)中,分别选用pH 为3.0～9.0, 4.0～6.0和 5.0～8.0 的载体两性电解质,发现载体两性电解质pH 范围为5.0～8.0时分离效果最好.使用Melanie 4 Trial软件统计BG蛋白质斑点数目约为290点,适于开展BG蛋白质组学研究.