凝胶阻滞试验分析铜绿假单胞菌LexA蛋白与其靶位点的特异性结合

目的：分析铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa，PA）的LexA与其靶位点的特异性结合的特性。方法：以PCR法扩增PA的LexA基因，将其克隆于原核表达载体pET-22b（＋），转化大肠埃希菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，采用镍离子亲合柱层析和Superdex-75凝胶过滤层析分离和纯化目的蛋白，以含推定LexA结合位点的片段CTGTN27ACAG为探针，用凝胶阻滞试验检测LexA蛋白与探针序列结合的能力及特异性。结果：构建了pET22bLexA重组质粒，IPTG诱导目的蛋白表达率约为25％，获得纯度大于95％的目的蛋白；CTGTN27ACAG能与LexA蛋白发生特异性结合。结论：推定LexA结合位点CTGTN27ACAG能与PA的LexA蛋白特异性结合，可能是LexA蛋白的结合靶位点。     

太原市大气细菌动态变化规律

在对太原市大气细菌污染,大气有害菌污染等项研究的基础上,与大气例行监测采样一致,选取６个采样点,进行太原市大气微生物污染动态变化规律的研究,得出如下结论;太原市大气细菌一般每日出现２次污染高峰和１次污染低谷：大气细菌浓度秋季－夏季－春季－冬季;在６个功能区中,商业区长风细菌浓度最高,对照点上兰最低,这一规律充分反映了大气细菌分布与人类,环境因素,气象因素,工农业生产密切相关。     

波长路由的计算机全光互连网络设计

波长路由的计算机全光互连网络设计周革井文才张以谟华锋陈炫田劲东陈先灵（天津大学现代光学仪器研究所３０００７２）在计算机光互连中，实现全光的路由变换节点，是减少光电／电光转换环节和这些环节造成的通信延迟和提高网络传输速率的关键。本文把时分复用和波长编码...     

对新时期中学语文教学观念的认识

对新时期中学语文教学观念的认识陈炫章十几年来，中学语文教学沿着“加强基础——培养能力——发展智力”的方向健康发展。当前，中学语文界正在进行深化改革，探索规律，引导学生生动活泼、主动地学习语文。为使中学大面积地进行语文教改，就要增强语文教师的改革意识，...     

凝胶阻滞试验分析铜绿假单胞茵LexA蛋白与其靶位点的特异性结合

目的:分析铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginoso,,PA)的LesA与其靶位点的特异性结合的特性.方法:以PCR法扩增PA的LexA基因,将其克隆于原核表达载体pET-22b( ),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用镍离子亲合柱层析和Superdex-75凝胶过滤层析分离和纯化目的蛋白,以含推定LexA结合位点的片段CTGTN27ACAG为探针,用凝胶阻滞试验检测LexA蛋白与探针序列结合的能力及特异性.结果:构建了pET22b-LexA重组质粒,IPTG诱导目的蛋白表达率约为25%,获得纯度大于95%的目的蛋白;CTGTN27ACAG能与LexA蛋白发生特异性结合.结论:推定Lex4结合位点CTGTN27ACAG能与PA的LexA蛋白特异性结合,可能是LexA蛋白的结合靶位点.     

铜绿假单胞菌的LexA蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化

目的:对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化.方法:采用PCR法从PAO1株基因组中扩增出1 086 bp的LexA基因,将此基因片段插入到表达载体pET32a( )上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.包涵体洗涤后用8 mol/L尿素溶解,以镍离子亲合柱层析作为第1步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第2步精细纯化,反相高相液相色谱法(HPLC)测定蛋白的浓度.结果:LexA以包涵体形式表达,表达量为45%,经镍离子亲合柱层析纯化后LexA蛋白纯度达到85%以上,回收率大于80%,镍离子亲合柱层析和凝胶过滤层析两步纯化目的蛋白,经HPLC测定,最终目的蛋白的纯度为98.97%.结论:在pET32a( )表达系统中实现了PA的LexA蛋白的高效表达,两步纯化法获得高纯度的目的蛋白,为进一步鉴定LexA靶位点奠定了基础.     

《西厢记·长亭送别》与《汉宫秋·灞桥饯别》比较分析

王实甫的《西厢记》与马致远的《汉宫秋》可谓是元杂剧中的佼佼者,它们在中国古代戏曲史上占有重要的一席。 元杂剧在通过剧中人物语言、唱曲渲染环境,表现人物复杂内心世界方面有其独到的成就。这里我想对同是离别的两折戏《西厢记·长亭送别》与《汉宫秋·灞桥饯别》进行比较分析。     

汾河太原段水体中氨氮的动态变化规律

针对汾河太原段氨氮近年的污染状况，利用１９９４年￣１９９８年氨氮的监测结果，分析了氨氮的时空变化规律。表明：氨氮在同一水期从上游至下游呈逐步上升趋势；在同一断面枯水期大于丰水期大于平水期；在不同年际，１９９４年最高，从１９９４年￣１９９６年呈明显下降趋势，１９９７年开始回升，而１９９８年又有所下降。     

量子拓扑方法对硫醇的定量构效关系研究

应用密度泛函理论(DFT),在B3LYP/6-31+G(d)水平上对20硫醇的分子结构进行几何优化和量化计算.将量子化学计算的部分结果引入分子的拓扑结构中,构建新型分子量子拓扑指数(QT),与计算所得的量化参数Gibbs自由能(G)、恒容摩尔热容(CV)一起描述硫醇的量子拓扑规律.QT指数不仅能有效地区分硫醇的分子结构,而且能较好的描述硫醇理化性质及色谱保留指数的变化规律.大部分所建模型的相关系数都大于0.99.本文对构建的模型采用留一法(LOO)进行验证,结果表明所构建的模型稳健、合理、有效,该方法有望在物质的QSPR/QSAR研究中得到广泛的应用.     

老舍语文教学活动与主张──现代作家与语文教育研究之一

老舍语文教学活动与主张──现代作家与语文教育研究之一陈炫章在中国现代文学史上，有一奇特的现象，这就是一大批优秀作家，同时也是语文教育家。他们为世人奉献出大量优秀文学作品的同时，也提出了他们的语文教育思想和主张。目前，对作家从教生涯、教学实践及其语文教...