哈萨克族食管癌中Survivin基因启动子区CpG岛真核表达载体的构建

 食管癌的形成与多种基因的异常表达有关,哈萨克族食管癌的发病又有其独特的机制。克隆并研究早期相关基因的启动子区CpG岛可为进一步揭示其发病机制奠定基础。本研究构建Survivin基因启动子区CpG岛真核表达载体,探讨其甲基化在新疆哈萨克族食管癌中的作用。通过Primer 5.0设计软件设计引物,采用常规PCR法从新疆哈萨克族食管癌患者的基因组DNA中扩增出Survivin基因启动子区CpG岛,CpG岛与真核表达载体pCAT3 promoter经HindⅢ单酶切后,连接试剂盒将二者连接并转导入甲基化酶缺陷的大肠杆菌E. coli ER1793中扩增。DNA测序证明获得Survivin基因启动子区CpG岛,并成功克隆入真核表达载体pCAT3 promoter中。     

留学生医学生物化学教学的体会及改进

医学生物化学是一门非常重要且较难掌握的医学基础课程,而留学生的全英文教学授课更是一个难点。通过不断摸索与改进,总结出一些经验与措施来提高留学生的教学,为今后的教学提供参考与思路。     

异常黑胆质成熟剂和清除剂对氧化应激的相关蛋白表达及其凋亡的影响

为了阐明临床治疗异常黑胆质性疾病有效的成熟剂和清除剂的作用机理,以H2O2诱导淋巴细胞的氧化应激模型,在细胞和分子水平上研究2种复方对氧化应激的相关蛋白表达、细胞凋亡的影响。采用western-blot研究淋巴细胞Bcl-2、NF-κB的表达;用荧光显微镜的双苯咪唑(Bisbenziimide)类Hoechst33258法检测分析凋亡指数、评价细胞凋亡的情况。结果显示,异常黑胆质成熟剂能够上调Bcl-2蛋白的表达,而清除剂能够下调该蛋白的表达,二者的作用相反。异常黑胆质成熟剂和清除剂能显著地抑制H2O2诱导的NF-κB激活,而前者本身却能促进NF-κB的活化,并且能抑制氧化应激诱导的淋巴细胞凋亡。由此得出结论:H2O2诱导淋巴细胞氧化应激模型的体外实验系统是研究传统医药复方生物效应信息的途径之一;异常黑胆质成熟剂及清除剂对氧化应激的淋巴细胞Bcl-2蛋白表达、NF-κB激活以及细胞凋亡的作用明显不同,提示两种复方临床应用有效性的作用机制与氧化应激诱导的细胞凋亡有关。