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原型泡沫病毒(prototype foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科,Bet是其编码的1个非结构蛋白.研究表明Bet蛋白在调控病毒蛋白的表达及病毒释放等过程中发挥重要作用.为进一步探究Bet的其他功能,通过酵母双杂交实验,以Bet作为诱饵钓取到与之相互作用的蛋白SUMO1,并初步探究了Bet对SUMO1功能的影响.实验结果表明,Bet与SUMO1在真核细胞中存在相互作用;Bet能够影响SUMO1在细胞中的定位,进而影响核定位蛋白NS1mut的SUMO化修饰. 相似文献
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肠道病毒EV71 型是引起儿童手足口病的主要病原体,3C 是其编码的蛋白酶之一.3C 在切割病毒前体蛋白为成熟蛋白的同时,切割一些具有重要功能的细胞蛋白,影响细胞的生理功能. 为进一步了解EV71 与宿主的关系,明确EV71 致病机制的细节,在前期以3C 蛋白为诱饵开展的酵母双杂交工作的基础上,选取了5 种细胞蛋白,分析其是否是3C 蛋白可能的切割底物. 发现ZMYM2 蛋白可以被3C 切割;这一切割效应是依赖3C 蛋白酶活性的特异性切割,无需RNA 介导. 上述发现为进一步揭示EV71 致病机制提供了线索. 相似文献
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SARS-CoV棘突蛋白片段在E.coli中的表达及免疫活性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
SARS-冠状病毒(SARS-CoV)棘突蛋白(Spike,S)是构成病毒包膜突起的主要成分,属于型膜糖蛋白,全长1255aa,在病毒入侵宿主细胞中起重要作用.本文利用生物信息学技术,界定冠状病毒SARS-CoVS蛋白的抗原决定区域,通过PCR扩增相应片段,克隆至原核表达载体pET-H,得到四个重组质粒pET-HS1、pET-HS3、pET-HS4、pET-HS5.经序列测定证实后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导获得表达,产物经紫外薄层扫描显示目的蛋白占菌体细胞总蛋白量的20%~30%.经Westernblot检测,表达蛋白与恢复期SARS病人血清呈高反应原性.纯化相应蛋白免疫小鼠,所获抗血清效价达1∶3×103.与SARS诊断试剂反应呈阳性,这一工作将为进一步研究S蛋白的定位、功能及SARS诊断提供帮助. 相似文献
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泡沫病毒(foamy virus, FV)属于反转录病毒科中的泡沫病毒亚科、泡沫病毒属.其基因组除编码结构蛋白Gag、Pol及Env外,同时还编码2个非结构蛋白Tas和Bet.Tas是泡沫病毒的正调控蛋白,通过结合在病毒启动子上游的DNA调控元件上正调控病毒基因表达.Bet对病毒复制具有一定的负调控作用,但作用机制尚无报道.利用实验室筛选得到的牛泡沫病毒(bovine fomay virus, BFV)3026可释放株(BFV-Z1),采用不同感染复数(0.01及0.1)感染BFV Bet(BBet)稳定表达细胞系及对照细胞系,分析传代后病毒滴度,确证BBet抑制BFV复制;分析BBet对病毒启动子活性的影响,发现Bet对BFV的2个启动子LTR和IP本底活性影响较小,但BBet可抑制BFV Tas(BTas)对BFV的LTR和IP启动子的反式激活.进一步机制分析发现BBet未显著影响BTas的细胞定位,也不能直接结合启动子上游BTas相关应答序列,推测BBet可能通过抑制BTas结合启动子应答元件之后的分子事件,如募集转录复合物等过程负调控病毒复制. 相似文献
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