感受态细胞制备和质粒转化冰浴时间对大肠埃希菌转化效率的影响

通过研究转化实验中加入质粒DNA的量、大肠埃希菌感受态细胞制备和质粒转化过程中冰置时间长短对感受态细胞最终转化效率的影响,分析其最佳转化效率参数,优化感受态制备和转化方法.结果表明,加入质粒（pBR322）DNA量为1～10ng,感受态制备过程中菌液冰浴时间在30～60min,以及感受态细胞加入质粒DNA并混匀后的冰置...     

中西医结合治疗妊娠恶阻20例临床观察

1 临床资料 妊娠恶阻20例中,年龄最大者35岁,最小者20岁;脾胃虚弱型8例,肝胃不和型12例;尿酮体阳性者16例.     

西咪替丁治疗过敏性紫癜的体会

过敏性紫癜是一种过敏反应性疾病 ,以广泛的小血管炎症为病理基础 ,表现为皮肤紫癜、消化道粘膜出血、关节肿痛及肾炎等临床表现。无特效治疗 ,在以往的常规治疗中 ,皮疹反复出现 ,患者恢复慢 ,我们加用西咪替丁治疗30例过敏性紫癜取得较好效果 ,现报道如下。1临床资料1 1一般资料男17例 ,女13例 ,最小年龄2岁 ,最大14岁 ,>6岁23例。1 2临床表现30例中均有紫癜性皮疹 ,23例伴腹痛 ,其中5例有便血 ,四肢关节疼痛17例 ,其中5例关节红肿 ,肉眼血尿3例。1 3病因病前有上感史者7例 ,有进食过量高蛋白饮食者6例 ,野外游玩后出现者5例 ,明确服用SM…     

东亚正钳蝎毒素基因BmKbpp的原核表达及其抗菌功能初步鉴定

一级结构分析和二级结构预测表明无二硫键蝎毒液多肽(NDBPs)BmKBPP具两亲性α-Helix结构,含有大量带净正电荷的碱性残基(Arg和Lys),符合多价阳离子抗菌肽的典型特征。采用PCR法和质粒载体pGEX-5X-1构建BmKbpp、EGFP及BmKbpp/EGFP与GST的原核融合表达载体,3个表达载体与pGEX-5X-1分别在Rossetta(DE3)菌中进行表达,并测定4个Rossetta(DE3)表达工程菌诱导表达的生长曲线。结果表明,BmKBPP是一个具有很强抑菌功能的抗菌肽,GST、BmKBPP及EGFP3个蛋白一起融合表达可获得少量蛋白的表达,这将为后续的功能研究和应用研究奠定基础。     

串联表达载体中短重复序列(BmKb1)_n模板的PCR效率及其优化条件研究

采用Overlap PCR法获取BmKb1基因,构建载体pGEX-6p-1/BmKb1,同尾酶技术用于构建串联表达载体pGEX-6p-1/(BmKb1)n(n=2,4,6,8,10)。以pGEX-6p-1/(BmKb1)n为模板,使用标准PCR程序研究短重复序列PCR效率;以BmKb1八倍体为模板,分别研究PCR循环数、引物终浓度及退火温度对短重复序列PCR效率及特异性的影响。结果表明:串联重复序列数目增加,则非特异性条带增加,特异性条带含量减少;BmKb1基因串联体PCR扩增在18～20循环数、引物终浓度为0.05～0.1μM、60～62℃较高退火温度时,可获得相对高产量高特异性BmKb1基因串联体PCR片段。本研究将为串联表达载体克隆、筛选、测序及基因组STRs序列克隆测序提供技术参考。