树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响

以含有楸灵素的楸树内生真菌FSN002发酵液为原料, 采用静态实验法考察树脂对楸灵素的吸附过程, 建立树脂吸附动力学模型, 并通过模型分析定量研究各种树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响. 结果表明, 树脂对楸灵素的吸附过程符合一级动力学模型, 其中反相树脂对楸灵素的最大吸附能力平均为39.39 mg/mL, 是离子交换树脂的1.38倍; 反相树脂吸附的楸灵素不易洗脱, 平均洗脱收率为12.2%, 离子交换树脂的平均洗脱收率为46.6%, 其中阴离子交换树脂D201的楸灵素洗脱收率最高达83.0%, 吸附速率较快, 综合性能较好.     

楸树内生真菌菌球形态和代谢谱与抗癌活性的相关性

选取不同菌球形态的楸树内生真菌FSN002作为菌种进行发酵,对其菌球发酵液的抗癌活性进行测试,并采用高效液相色谱法对发酵液的成分进行初步分析.结果表明：所得发酵液中黄色物质由具有中等疏水性抗癌活性成分和其他杂质组成;具有周生菌毛的大菌球A可以产生黄色抗癌活性物质和无活性的黄色杂质,且其产量较高;而具有小头、长尾的乌贼状菌球D产生的活性抗癌成分较少,但所产生的黄色杂质也较少且纯度高,有利于后续活性抗癌成分的分离纯化.     

在地钱中构建简便、高效的基因表达检测体系

实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)广泛应用于基因转录水平的差异分析.选择稳定表达的参比基因,设计理想的参比引物扩增参比基因进而对样本进行标准化处理是得到可靠的qRT-PCR分析结果的前提.地钱具有基因组小、生长周期短、易于培养繁殖、转基因效率高等优势,已成为一种新兴的合成生物学模式植物.植物合成生物学的研究产生了大量的转基因和突变系等地钱材料,同时也提出了在地钱底盘中提升qRT-PCR的效率和可靠性,从而快速准确分析外源以及内源基因表达水平的现实需求.对地钱基因组进行生物信息学分析发现,地钱中参比基因ACT7存在两个高度同源的基因序列,其中任一基因的表达均不太稳定,但两个基因的表达存在一定的互补性.为了在地钱中构建简易、高效的qRT-PCR分析体系,利用数学模型,分析qRT-PCR误差传导机制,建立参比引物的综合评价指标体系.研究发现,能够同时扩增两个ACT7高度同源基因的共退火引物对应的表达水平更为稳定,其中编号为3～6的引物在扩增效率、表达水平及稳定性等多个指标上表现均衡优越,从而开发了一种在地钱中快速准确检测基因表达水平的qRT-PCR平台技术,同时也为在其他物种中如何优化qRT-PCR检测体系指明方向.