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作为ICE蛋白酶家族的一员 ,CPP32 (又称Yama ,Apopain)在许多形式的凋亡途径中起极其重要的作用 .为研究调控CPP32的分子 ,本文运用酵母双杂交系统杂找与CPP32相互作用的分子 .首先将CPP32基因克隆到 pGBT9质粒载体中 ,得到的重组质粒命名为pGBT9/CPP .然后将 pGBT9/CPP转化酵母菌HF7C ,再导入人白血病文库质粒 ,用营养缺陷培养基 (TrpLeuHis)初步筛选文库中插入cDNA所编码的序列与CPP32相互作用的菌落 ,再进一步检测 β 半乳糖苷酶活性 .我们共得到 4 2个在营养缺陷培养基上生长的菌落。β_半乳糖苷酸活性检测表明 ,只有 5个菌落在显色底物X_gal的存在下变蓝色 .提取该 5个阳性酵母菌落的质粒 ,电击转化E .coliHB10 1.提取文库质粒 ,经酶切鉴定、重新转化及序列测定后发现 ,与CPP32相互作用的分子为一新型 15肽 ,推测它可能是与CPP32相互作用的结构域 相似文献
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Ｇｓα是与激活腺苷酸环化酶信号转导途径相关的蛋白质,不同的ＧｓαｍＲＮＡ是由不同形式的剪接或利用不同的启动子产生的。报道人白血病细胞株中Ｇｓα转录物的一种新型民学剪接。以来自Ｊｕｒｋａｔ细胞株的人白血病文库ｃＤＮＡ及人白血病细胞株ＨＬ－６０ｍＲＮＡ反转录后的ｃＤＮＡ第一链模板,ＰＣＲ扩增出Ｇｓα基因完整编码区,ＤＮＡ序列分析表明,ＧｓαＬｅｕ与正常Ｇｓα相比有２个区域发生不改变阅读框架的缺失,一个 相似文献
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含有ＣＰＰ３２基因的逆转录病毒载体的构建姚潇１叶棋浓２王恒梁２袁仕取１刘全宏１苏国富２（１陕西师范大学生命科学学院，西安７１００６２；２军事医学科学学院生物工程研究所，北京１０００７１；第一作者，男，３０岁，助教）ＣＰＰ３２（ＣｙｓｔｅｉｎｅＰｒｏｔ... 相似文献
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