虫荧光素酶N末端缺失

目的是通过虫荧光素酶Ｎ末端氨基酸的缺失,研究缺失对酶活性的影响。采用聚合酶链式反应的方法,构建虫荧光素酶Ｎ－末端缺失７,８,９个氨基酸残基的突变体,导入大肠杆菌ＤＨ５α菌株中直接得到表达,再分离纯化粗酶,并检测酶活。结果表明,Ｎ末端缺失７个氨基酸的突变体几乎没有活性（小于天然活性的０．５％）,Ｎ末端缺失８个以上氨基酸残基的突变体则完全丧失活性。由于Ｎ末端缺失６个氨基酸的突变体保持了７７％的酶活性,因而萤火虫荧光素酶Ｎ末端第７个氨基酸与酶的催化活性密切相关。     

大熊猫肌肉肌酸激酶的纯化与性质

用改进的Ｋｕｂｙ等人方法从大熊猫骨骼肌中纯化了肌酸激酶，并对此酶的某些性质进行了研究。纯化倍数为 ３５．７；收率１７．３％；比活力为 ５５．３Ｕ／ｍｇ；等电点为 ６．６０。聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为一条带。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其亚基分子量为４２ ０００，总分子量为 ８４ ０００，该酶是由两个相同亚基组成的二聚体。酶对肌酸的Ｋｍ 为 ５．２６ｍｍｏｌ／Ｌ；对ＡＴＰ的 Ｋｍ为 ０．７４ｍｍｏｌ／Ｌ，酶的最适温度是 ３０～３６℃；酶的最适ｐＨ大于８．０。     

精氨酸激酶及其底物复合物的结晶和结晶学初步研究

精氨酸激酶是一种存在于无脊椎动物体内的磷酸源激酶,对于无脊椎动物体内能量的代谢、储存和利用具有至关重要的作用.海参体内的精氨酸激酶在磷酸源激酶的进化中具有特殊的地位,氨基酸序列比对的结果表明:它与鲎源单亚基精氨酸激酶的氨基酸序列的同源性为64%,而与双亚基兔肌肌酸激酶的氨基酸序列同源性却达到了75%.为了揭示海参源精氨酸激酶的催化机理,研究其与单亚基精氨酸激酶及肌酸激酶催化机理的异同,实验获得了精氨酸激酶复合物晶体,取得了X射线衍射数据,进行了结晶和结晶学的初步研究.     

蛙胚水晶体外胚层刺激切去眼泡的脑壁成眼

我们曾经报导在14、15和16期无尾类胚进行切除眼泡保留预定水晶体外胚层的手术以后,有时在间脑壁上发生眼杯。当时推测,可能是由于脑壁受了水晶体外胚层的接触刺激所激发。为了检验这个假定,用15、16期黑斑蛙(Rana nigromaculata)胚为材料,进行了三组实验:(A) 切除眼泡,将水晶体外胚层恢复原位并略加压力使它尽可能与前脑壁接触;(B) 切除眼泡,填补一块从另一胚切取的前脑先端组织,使后者与水     

黑斑蛙胚心臟發生前後軸的决定和調節

一、引言若干年前,第脱维楼(Detwiler 1918)氏,把美西螈(Amblystoma punctatum)胚的将能发生前肢的區城内物質,徒胚体上取出来,移植到一個不是生肢的區域,让他发生,结果仍然发生出一個前肢。後来爱克曼(Ekman 1921)和史推尔(stohr 1924b)先后做了相類似的试验,他们从赤腹蟾(Bombinator)的胚体,取出他的将能发生心臟的物質,移植到一個纯由外胚层组成的球囊裹去,让他发生,结果仍能发生出一個正常的心臟来。从这些事实,很清楚的看出来,心     

SDS滴定时氨基酰化酶的溶液构象和活力变化的研究

本文以荧光发射光谱和紫外差吸收光谱的方法，研究了ＳＤＳ滴定氨基酰化酶溶液时构象变化的情况，同时测定了相应的物的活力的变化。实验结果发现酶的构象变化程度与相应的失活的程度大致平行。这表明酶基酰化酶构象的完整性是酶具有催化活力的基础。     

蛙胚眼泡碎片的调整与分化和预定水晶体外胚层在调整中的作用

通过移植和切除的试验结果,证明蛙胚眼泡的远、中、近三部分都有调整成眼杯和分化为脑组织的可能,因而确定眼泡是一个具有双重发生潛能的原基。试验並发现眼泡的这种发生潛能表现出两端不同的极性,呈现出方向相反的两个级度,成眼最高点在远端而成脑最高点在近端。试验又证明预定水晶体外胚层的接触诱导确有促进眼泡材料转变眼杯的作用。但另一方面亦表明在成眼材料足够时,卽使没有预定水晶体存在亦有可能调整成眼杯。(不过在后一情形仍须考虑到由四周生拢弥合的外胚层在接触眼泡材料后,有转变为次生预定水晶体的可能,因而或许仍可由它发生影响。)从试验中发见预定水晶体外胚层又能激发蛙胚间脑产生出眼。最后根据眼泡能分化脑和间脑能产生眼的事实,表明眼泡与间脑对於发生眼与脑都没有到最后决定而是在可变性决定阶段。     

用点突变方法研究海参精氨酸激酶的活性位点

为研究动物能量代谢,用点突变的方法从双亚基海参(Stichopusjaponicus)精氨酸激酶中得到了3个突变体:C274A、R283G和H287A,并通过大肠杆菌E.coli表达。大部分精氨酸激酶都以包涵体的形式存在。经过纯化之后对3种突变体的催化活性和一些结构特征进行了分析。这3种突变体丧失了绝大部分催化活力,特别是突变体C274A,与野生型相比除了活性完全丧失之外,结构却几乎没有变化。这3个残基对海参精氨酸激酶结构或功能的保持有着重要作用,Cys274残基可能是海参精氨酸激酶的活性位点。     

Inactivation of Lactate Dehydrogenase from Pig Heart by o—Phthalaldehyde

IntroductionLactate dehydrogenase( EC1 .1 .1 .2 7,LDH) playsa vital role in the energy flow of higher organisms.It is a tetrameric enzyme that catalyzes thereversible dehydrogenation of lactate,converting itto pyruvate.The enzyme exists in five isozymicforms which are not usually found all together inone tissue or organ.At least three different typesof LDH subunits( M,H and X) are known invertebrates,butthe X subunits are usually presentin only one or at mosta few tissues[1,2 ] .　Variou…     

氨基酰化酶在低浓度脲溶液中的失活并非解聚所致

氨基酰化酶(Aminoacylasc,EC3.5.1.14)是一个含金属锌离子的二聚体酶,亚基分子量约为43 000.Zn~(2 )位于每个亚基的活性部位上,且为酶的活性所必需,过去的研究结果表明锌离子对酶活性部位结构有一定的稳定作用,最近报道的氨基酸序列表明,该酶分子中有16个色氨酸残基和18个酪氨酸残基.我们已经知道16个色氨酸残基中部分位于分子