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灵芝能够调节和增强机体免疫力,具有极高的药用价值;LZ -8蛋白是最早被分离研究的免疫调节蛋白,它不仅是灵芝生命活动的重要物质而且具有独特免疫原性.实验采用CTAB法提取灵芝基因组DNA,PCR扩增全长lz -8基因;利用XbaⅠ,XhoⅠ位点将lz -8编码基因片段克隆到原核表达载体pET -28a中,构建原核重组表达质粒pET -lz8,转化BL21(DE3)并进行SDS - PAGE及Western - blot分析.结果表明:克隆的lz -8基因与GenBank报道的序列同源性达到87.5%～100%;重组菌株经IPTG诱导后,lz -8基因得到了高效表达,目的蛋白表达量可达菌体总蛋白的36.52%. 相似文献
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通过对抗菌肽Protegrin成熟肽的氨基酸组成和作用机理分析,并根据已报道的Protegrin基因序列设计引物,PCR扩增获得定点诱变的突变体基因pg-g,其编码蛋白的末端相对于野生型增加1个非极性氨基酸Gly.利用表达载体pET-28a将突变体基因pg-g转化到大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE检测表明目的蛋白得到成功表达.通过对表达产物进行抑菌实验发现,定点突变基因pg-g表达产物对大肠杆菌的抑菌效果有明显提高. 相似文献
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