烟草过氧化物酶Ⅰ的分离纯化及部分光谱特性研究

烟草过氧化物酶同工酶Ⅰ (TOPⅠ )的分离纯化过程 ,主要包括匀浆、超声破碎、过滤、(NH4) 2 SO4分级沉淀、DE 5 2纤维素阴离子交换层析、SephadexG 75凝胶层析、DEAE SephadexA 5 0阴离子交换层析 .经纯化的TOPⅠ ,纯化酶的比活力为 482 6U/mg ,在SDS PAGE上显示出一条蛋白带 ,分子量在 2 1 0 0 0左右 ,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI$CTOF MS)测得TOPⅠ分子量为 2 1 888.5 ,等电点pI为 3.5 ;光谱学分析揭示 ,在 40 2nm处有一典型的Soret带 ,在 498nm和 636nm处有特征吸收峰 ,表明TOPⅠ为一含血红素的酸性蛋白酶 .酸度对TOPI的在紫外可见区的特征吸收峰及荧光光谱均产生一定的影响 ,反映了TOPⅠ分子独特的光谱学特性     

生理温度下苯丙氨酸-葡萄糖模式体系Maillard反应的影响因素研究

测试了D-葡萄糖和L-苯丙氨酸在37℃,pH 6.5的条件下反应1～35 d所得Maillard反应产物的颜色强度,研究了溶剂水分含量以及金属离子Fe2+,Cu2+对D-葡萄糖和L-苯丙氨酸模式Maillard反应体系的影响.结果表明:在本实验条件下模式体系Maillard反应速率和体系水分含量成反比关系,随着水分含量的降低反应速率逐渐升高;金属离子Fe2+,Cu2+能促进模式体系Maillard反应,有效缩短反应时问,并且随着金属离子浓度的增加其催化作用先增强后减小;当Fe2+,Cu2+的浓度为0.2 mmol/L时,其催化作用最强,并且Cu2+的催化作用大于Fe2+.     

高纯度烟草过氧化物酶的酶学特性研究

从K326的烟叶中采用除植物褐色素新技术，经分离纯化，得到单一过氧化物酶I（TOP I），该酶是一种以血红素为辅基的含铁蛋白质。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOF－MS）测得TOP I分子量为21888．5Da，等电点pI为3．5；酶反应的最适pH为6．0，最适温度为45℃，70℃保温15min残余活力为50％，具有良好的热稳定性，动力学分析表明：烟草中的过氧化物酶I与愈创木酚（一元酚）结合力最强，邻苯二酚（二元酚）次之，焦性没食子酸（三元酚）作用较小。TOP I和Km(愈创木酚）为0．132mmol/L;Km(H2O2)为0．598mmol/L.N3^-,CN^-1,Fe^3 ,Fe^2 和Sn^2对酶有较强烈的抑制作用，重金属离子Ag^ ,Pb^2 ,Cu^2 对该酶的活性有激活作用，而NO2^-、Hg^2 ,Cr^3 对酶活力无显著影响。     

胰岛素与去五肽胰岛素可及性的比较

利用自制的计算机程序，计算了猪胰岛素和去五肽（Ｂ_（２６）－Ｂ_（３０））胰岛素的可及性，根据计算结果分析讨论并比较了这两种蛋白质的三维结构、分子表面情况及其相关的生物功能。     

烟草行业污染源数据库管理系统

针对烟草行业污染源,文章运用Ｆｏｘｐｒｏ设计了污染源数据库管理系统。根据烟草行业污染的具体特点和污染源管理的实际要求,设计了系统的主要功能。该系统可为用户提供企业基本情况、污染源数据的查询、浏览、分类等信息以及统计、计算、对比及相应格式的打印输出等服务     

N-3与辣根过氧化物酶相互作用的光谱研究

在没有过氧化氢存在情况下,利用紫外-可见光谱和荧光光谱研究了N-3与辣根过氧化物酶的相互作用.结果显示两者之间存在一个位点的结合,形成了配合物,其形成常数为7.9×108 L·mol-1; N-3与辣根过氧化物酶的结合,使得辣根过氧化物酶的荧光生色基团的微环境的极性增大.