肌营养不良蛋白dys参与调控Hippo信号通路

Hippo信号通路最早在黑腹果蝇中发现,现已被证明在哺乳动物中也是保守的.Hippo通路在器官发 育和组织稳态中起着重要作用,Hippo信号通路异常与许多癌症的发生相关.Hippo信号通路依赖于核心激酶级 联反应,磷酸化转录共激活因子Yorkie(Yki)进而调控下游靶基因的转录.尽管Wts是Hippo通路的关键激酶组 分,但其蛋白质活性调节机制仍有待深入研究.通过质谱分析,发现并验证了Hippo信号通路核心激酶Wts与杜 氏肌营养不良症相关蛋白dys之间存在相互作用,并发现dys能够通过促进Wts的细胞膜定位激活Wts进而调控 果蝇器官大小.     

dRaf1转基因果蝇的构建与表型分析

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中最重要的模式生物之一.首先,将dRaf1基因克隆到Gal4诱导表达的染色体定点插入载体p UAST-att B质粒后进行显微注射,成功构建了可诱导dRaf1表达的转基因果蝇.将dRaf1转基因果蝇品系与眼睛或翅膀特异性表达GMR-Gal4和Nub-Gal4品系果蝇分别杂交,观察dRaf1在果蝇或翅膀过表达的表型,确定其发育特征.其次,将翅膀中过表达dRaf1的果蝇与HpoRNAi的果蝇杂交发现,dRaf1在果蝇翅膀中的表型明显增强.本研究为大规模筛选修饰dRaf1活性与功能的调节因子奠定基础.     

CRISPR/Cas9系统介导果蝇miR-2基因簇的定点敲除

microRNAs可作为肿瘤抑制因子或促进因子发挥作用,其表达与肿瘤的发生发展密切相关.miR-2基因家族成簇表达,是果蝇基因组中编码microRNA的最大的基因家族,但其功能不确定.为了研究miR-2基因家族的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统,成功敲除了miR-2家族位于2号染色体左臂(2L)的基因簇(ΔmiR-2),并初步确定了ΔmiR-2可以抑制促癌因子Yki活性,为研究miR-2家族的功能奠定了基础.