一种蛋白-药物结合常数的测定方法

目的建立一种蛋白-药物结合常数的测定新方法。方法以固定化牛血清白蛋白为固定相,磷酸盐缓冲溶液为流动相,获得不同进样量下药物的液相色谱保留参数,以溶质进样量与保留值的关系方程进行拟合,计算蛋白-药物结合常数(直接进样法)。结果测定了咖啡酸(CA),汉黄芩素(WO)和木犀草素(LU)3种药物与固定化牛血清白蛋白(BSA)在人体生理条件(37℃,pH7.40)下的结合常数,其数值高于竞争置换法,但与相关文献数据接近。结论直接进样法可作为一种新方法用于研究蛋白-药物的相互作用。     

α-淀粉酶及α-糜蛋白酶的脲变动力学研究

用疏水色谱（HIC）对8.0mol/L脲变性的α－淀粉酶（α-Amy)和α－糜蛋白酶（α－Chy)的变性动力学进行了研究。结果表明：α－Amy的变性为平缓的渐变过程，其变体数目较多，且绝大多数变体的疏水性都小于天然蛋白；α－Chy是骤变（可能是瞬间变性）过程，相对而言α－Chy的变体数目较少，且疏水性均大于天然蛋白。认为两种蛋白不同的脲变动力学行为，可能是因蛋白中α－螺旋含量以及蛋白质自身稳定性不同所致。     

β2-肾上腺素受体亲和色谱及其在苦杏仁活性成分筛选中的应用

用Sepharose-沙丁胺醇亲和色谱柱从家兔肺组织中纯化得到β₂-肾上腺素受体(β₂-adrenoceptor, β₂- AR), 以大孔硅胶为载体, 采用温和的化学偶联方法, 将β₂-AR通过共价键均匀地固载在大孔硅胶表面, 用硫酸沙丁胺醇、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸肾上腺素和盐酸普萘洛尔表征β₂-AR色谱柱的保留特性, 从而建立了β₂-AR亲和色谱方法, 并将该法用于苦杏仁粗提物中活性成分的筛选. 结果表明, 色谱固定相上的β₂-AR能保持其生物活性和选择性; 苦杏仁粗提物中与该受体色谱柱有保留作用的活性成分为苦杏仁苷. 与已有色谱筛选方法相比, 该法具有稳定性好和选择性强的特点, 可对中药中与β₂-AR作用的活性成分进行快速准确筛选, 可为中药等复杂体系中药物活性成分的筛选提供新途径.     

在液-固界面上变性蛋白折叠自由能的测定

依据液_固界面上溶质计量置换保留模型 ,以及固体表面吸附自由能变可分成吸附及解吸附自由能变 2个独立分量 ,提出了变性蛋白在高效疏水色谱 (HPHIC)固定相表面折叠自由能的测定原理、折叠自由能计算公式和实验测定方法 ,分别对胍变溶菌酶和α_淀粉酶的折叠自由能进行了测定 ,发现变性蛋白在HPHIC固定相表面的折叠自由能远较在溶液中的高 ,且随变性剂浓度的增大而增大 .其相对平均标准偏差溶菌酶为± 4.7%,α_淀粉酶为± 3.0 %,表明该方法有好的重现性     

高分子聚合物色谱填料研究的新进展

高分子聚合物色谱填料研究的新进展@卫引茂@耿信笃...