梗死后大鼠缺血心肌基因差异表达谱构建

为寻找梗死后大鼠缺血心肌差异表达基因, 采用结扎Wistar大鼠冠状动脉左前降支的方法, 建立急性心肌梗死(AMI)模型, 饲养7 d后处死大鼠, 提取正常和缺血心肌总RNA, 应用长标签基因表达系列分析(long serial analysis of gene expression, LongSAGE)构建AMI后大鼠缺血心肌基因差异表达谱, 荧光定量PCR鉴定部分差异基因的表达. 结果显示, 在建立的AMI后缺血心肌和正常心肌组织LongSAGE标签库中, 共获得标签15966个, 正常心肌获得9646个, 梗死后缺血心肌获得9563个. 通过NCBI网站BLAST同源性分析后, 发现新核苷酸序列标签7665个. 与正常组比较, 142个基因在AMI大鼠心肌组织中的表达有显著性差异(P < 0.05), 这些差异基因主要与氧化磷酸化、三磷酸腺苷(ATP)合成、糖异生等能量代谢通路相关. 荧光定量PCR的鉴定结果与LongSAGE差异表达结果基本一致. 结果表明, AMI可引起多基因表达异常, 能量代谢作用通路相关基因的异常表达是造成AMI后心肌损伤的重要分子机制.     

福辛普利钠预处理对缺血后适应大鼠心肌组织Toll样受体表达及炎症因子的影响

大鼠预先灌胃福辛普利钠, 观察其和缺血后适应(ischemic postconditioning, IPoC)对大鼠心肌缺血再灌注(ischemic reperfusion, I/R)损伤后心肌组织Toll样受体(toll-like receptor, TLR)表达及心肌组织炎症浸润的影响. 将60只SD (Spragu-Dawley)大鼠随机分为假手术组、I/R组、IPoC组以及福辛普利钠+IPoC组, 每组15只. 假手术组大鼠心脏前降支下置线不结扎; I/R组予以心脏前降支结扎30 min, 再灌注1 h; IPoC组给予心脏前降支结扎30 min, 后予以3次10 s的再灌注/缺血循环, 再持续灌注1 h; 福辛普利钠+IPoC组则预先给予福辛普利钠片0.9 mg/kg, 连续灌胃14 d, 于末次灌胃2 h后, 施以IPoC组的干预过程. 所有实验大鼠腹主动脉取血并分离出心脏组织. 比色法测定血清肌钙蛋白T (cardiac troponin T, cTNT)的含量, NBT染色测定大鼠左室心肌梗死面积, 酶联免疫吸附测定法测定心肌组织单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemotactic protein-1, MCP-1)和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平. 免疫组织化学方法测定心肌组织TLR2及TLR4的表达, HE染色观察心肌组织炎性细胞的浸润. 结果表明, 与I/R组比较, IPoC组大鼠心肌梗死面积明显缩小(P<0.01), 大鼠血清cTNT水平显著降低(P<0.01), 心肌组织MCP-1, TNF-α含量和炎性细胞浸润数量明显下降(P<0.05, P<0.01), 心肌组织TLR2及TLR4的表达被显著抑制(P<0.01); 与IPoC组比较, 福辛普利钠预处理可进一步降低IPoC大鼠心肌梗死面积(P<0.05), 心肌组织TNF-?水平也显著降低(P<0.01), 对心肌TLR2及TLR4的表达有进一步抑制(P<0.05). 血管紧张素转化酶抑制剂福辛普利钠预处理可加强IPoC对I/R大鼠心肌的保护作用, 其机理可能与抑制TLR介导的炎症信号通路和趋化因子反应有关.     

中西合璧开创医药学未来

传统中医药学是华夏民族几千年医疗实践的智慧结晶，在欧洲工业革命发生之后的二百多年里，由于社会、文化、经济乃至政治等诸多原因，尽管作为东方医学的传统中医药学研究从未间断发展，但其步履维艰，未能与西医学齐头并进。在现代医学的整体层面上，主导潮流是以现代解剖学、现代化学、生物学、生理学、病理学为基础的西医学。在世界多数国家或区域，传统中医药的诊疗模式尚不能被广泛接受或认可，或者仅作为互补医学(complementary medicine)或替代医学(ahernative medicine)应用于疼痛、疲劳、失眠等症状的医疗实践中。     

冠心病差异基因表达谱的构建及目标基因的功能分析

选择经冠脉造影证实的冠心病患者16例和健康对照者8例, 抽提RNA, 筛选冠心病相关差异基因, 构建冠心病差异基因表达谱, 并使用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对目标基因进行鉴定. 另按原标准筛选冠心病患者30例和健康对照者40例, 验证目标基因IL-8的临床相关性. 在此基础上, 以12例健康自愿者为对象, 研究IL-8对血小板聚集率、血小板活化和血小板聚集形态学的影响. 结果表明, 冠心病相关的差异基因共有107个, 其中分子功能和生物学途径涉及炎症免疫反应的有14个(13.1%); 通路显著性分析发现, 冠心病相关有意义通路共15个, 其中有4个涉及炎症免疫反应. 目标基因鉴定结果与基因芯片检测结果一致. 冠心病患者血清IL-8水平(83.21 ± 34.33 pg/mL)显著高于健康对照者(63.34 ± 36.36 pg/mL) (P < 0.05). 血小板聚集率、血小板活化和血小板聚集形态学结果显示, IL-8具有诱导血小板活化的作用. 本文从核酸水平揭示了冠心病与炎症免疫反应的相关性, 目标基因IL-8可能通过影响血小板的活化程度而参与了冠心病的发病过程.     

益气养阴活血配伍对缺血心肌差异基因表达的影响

本研究在既往建立的大鼠缺血心肌基因差异表达谱基础上, 探讨了益气养阴、活血及其配伍中药对缺血心肌差异基因表达影响及可能的作用机制. 采用冠状动脉左前降支结扎法制备大鼠AMI模型, 造模后将大鼠随机分为5组: 模型组、美插洛尔组、益气养阴组、活血组和益气养阴活血组, 并设正常组和假手术组, 假手术组只穿线不结扎, 术后24 h给予正常组和假手术组等体积生理盐水, 给予其他各组相应药物灌胃. 第8天截取心肌缺血区组织, 光学显微镜观察病理形态, 分别应用荧光定量PCR及化学比色法检测目标基因mRNA表达水平和翻译蛋白酶活性. 结果显示, 模型组HE染色可见心肌组织缺血区心肌肿胀、炎细胞浸润和细胞溶解, 各用药组病理改变较模型组均明显较轻, 益气养阴组、活血组能量代谢相关基因细胞色素C氧化酶5a (Cox5a)和ATP合酶5e (ATP5e)基因表达量和酶活性均出现了下调趋势, 而益气养阴活血配伍组Cox5a, ATP5e对应的蛋白酶活性显著下降(P < 0.05). 这表明能量代谢作用通路相关基因的异常表达是引起AMI心肌损伤的重要分子机制之一, 益气养阴活血配伍中药影响COX5a, ATP5e等能量相关功能基因的表达是其抗心肌缺血的可能机制, 较单纯益气养阴、活血效果理想.     

益气养阴活血法对急性心肌梗死血运重建后心肌灌注及长期预后影响的临床研究成果

心血管病目前为人类死亡的首要病因，其中一半以上的心血管病患者死于急性心肌梗死（AMI）。上世纪80年代以来广泛应用临床的梗死相关动脉血运重建治疗技术，由于受心肌组织无复流（No-reflow）现象的严重影响，超过25％的患者即使冠脉血流达TIMI3级，仍不能获得满意的心肌微循环血流灌注，心肌继续缺血、坏死，发生心律失常和心功能受损，由此引起的近、远期心血管事件无法改善。     

西洋参茎叶总皂苷对双联抗致心梗后大鼠胃黏膜损伤的修复作用

采用结扎左冠状动脉前降支制备实验性急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)模型大鼠,灌胃氯吡格雷和阿司匹林(双联抗)以及西洋参茎叶总皂苷(panax quinquefolius saponin,PQS),观察PQS在双联抗治疗过程中对大鼠胃黏膜损伤的修复作用.将实验性AMI模型手术成功的SD(Spragu-Dawley)大鼠随机分为AMI模型组、双抗组和双抗加PQS组,每组12只,另选12只大鼠作为假手术组(只穿线不结扎冠状动脉).各组动物造模后第2天开始灌胃,连续28 d后检测血清胃泌素(serum gastrin,GAS)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和血浆胃动素(motilin,MTL)、内皮素(endothelin-1,ET-1)的含量,观察胃黏膜组织病理和超微结构的变化.结果表明,与AMI模型组比较,双抗组大鼠胃黏膜Guth评分和Whittle评分显著升高(P0.01).与双抗组比较,双抗加PQS组Guth评分和Whittle评分显著下降(P0.01).与AMI模型组比较,双抗组大鼠血浆MTL、血清IL-1β及TNF-α含量显著升高(P0.05),ET-1和GAS含量显著下降(P0.05).与双抗组比较,双抗加PQS组大鼠的血清NO和GAS显著升高(P0.05),血浆ET-1,MTL,血清IL-1β,TNF-α显著降低(P0.05).PQS对双抗致大鼠胃黏膜的损伤具有一定的修复作用,其机理可能与促进GAS,NO保护因子的生成,减少炎性因子的分泌,降低ET-1,MTL损害因子水平等机制相关.     

活血化瘀中药与抗血小板治疗

抗血小板药物的临床应用是心脑血管疾病治疗领域的里程碑,但是随着应用时间的延长及"双重"甚至"三重"抗血小板药物的联用,其不良反应如抗血小板药物抵抗或出血风险的发生率大增,因此寻找新的安全有效的抗血小板药物或改善抗血小板药物抵抗的方法,成为目前心脑血管疾病防治领域的国际性关注点.活血化瘀中药具有明确的抗血小板及抗动脉粥样硬化的临床疗效,从传统活血化瘀中药中筛选出高效、低副作用的抗血小板药物近年来引起国内外学者的极大关注.本文对近年来国内外活血化瘀中药抗血小板治疗作用的研究进展作一评述.     

免疫损伤结合高脂饲料致兔动脉粥样硬化斑块形成的相关因素分析

摘要: 目的利用免疫损伤结合高脂饲料方法建立兔实验性动脉粥样硬化( AS) 斑块形成模型,探讨影响其斑块形 成的相关因素。方法日本大耳白兔30 只。免疫损伤和高脂饲料组兔经耳缘静脉注射牛血清白蛋白( BSA) 生理 盐水溶液( 250mg / kg) 并喂食高脂饲料,7d 后再次经耳缘静脉注射同等剂量的BSA。另设单纯喂养高脂饲料的AS 模型组和普通饲料喂食的正常兔组,72 d 后取血测定动物的血脂指标、炎症因子、血管活性物质、血小板聚集黏附 及血管内皮功能等指标,分析上述测定指标和兔主动脉斑块形成及病理变化的相关性。结果72 d 后,免疫损伤 结合高脂饲料组和单纯高脂饲料的两组经病理观察主动脉均有斑块形成,其前者的血脂水平、血清炎症因子白介 素－ 6( IL － 6) 、白介素－ 8( IL － 8) 、高敏C － 反应蛋白( hs-CRP) 含量均比单纯高脂饲料组显著增高( P ＜ 0. 05,P ＜0. 01) 。经Pearson 相关系数统计处理,上述指标和免疫损伤加高脂饲料致斑块的形成具有正相关性,和HDL-C( r = － 0. 58) 、NO( r = － 0. 26) 等指标具有负相关性。结论免疫损伤结合高脂饲料导致兔AS 斑块形成和血脂水 平、炎症因子、血小板聚集及血管活性物质等经典指标的异常有显著相关性,具有评价价值。