细胞色素b5 Phe58在稳定蛋白质结构中的作用

为了解细胞色素b5血红素疏水袋中芳香性氨基酸残基和卟琳环之间π-π电子云堆积对蛋白质结构和性质的影响，用蛋白质工程的定点突变技术，分别以Tyr和Trp取代Phe58残基。用UV—vis和荧光光谱研究了F58Y，F58W突变体蛋白盐酸胍诱导的去折叠过程；研究了突变体蛋白与脱辅基肌红蛋白血红素转移反应的动力学，结果表明，用不同的芳香性氨基酸取代Phe58残基，减弱了血红素辅基与蛋白质肽链之间的结合、导致蛋白质的热变性中点温度Tm和盐酸胍变性中点浓度Cm下降、血红素转移反应速率增加以及氧化还原电位移动。     

线粒体内膜膜蛋白结构研究的新方法及应用

线粒体是细胞内极其重要的细胞器。一方面作为细胞的能量工厂,提供ATP来满足细胞的各种活动需要;另一方面,作为细胞内信号传导的节点,调控细胞内许多重要的生理进程。因此线粒体的功能紊乱直接导致多种重大疾病,对线粒体的研究是我国医学健康领域的重大需求。线粒体内膜如何进行跨膜信号传导,从而完成各项生理学功能,这方面的研究工作还比较缺乏。本项目旨在研究和发展新方法,改善长期困扰真核膜蛋白表达和纯化的瓶颈,力争探索出一条适合于实验室常规应用的真核膜蛋白表达纯化的路径。并在膜蛋白结构研究的三大主要技术——X-射线晶体衍射、生物冷冻电镜和核磁共振的现有基础上,开发和利用新技术和新方法,对具有重大生理功能的线粒体内膜膜蛋白质开展结构生物学和生理学功能研究,阐明线粒体跨内膜信号传导的科学问题。