浅议水环境监测与评价体系

随着资源节约型社会口号的提出,我国对环境的重视程度越来越高,对于水资源方面,国家目前已经开始着手建立水环境监测与评价体系。本论文在阐述了水环境监测与评价体系的作用和存在的问题的基础之上,就如何完善这个体系提出了自己的几点合理建议,为体系今后更好的发展提供了指导。     

盐芥WBC11克隆与RNAi载体的构建

作为植物在非生物胁迫下耐受机制研究中的模式植物之一,盐芥具有耐受干旱、高盐和高低温等抗逆性特点.本文以盐芥中脂类代谢的关键基因WBC11作为研究对象,利用q-PCR技术克隆盐芥WBC11 5’端300bp序列(简称WBC11-300),通过gateway的方法构建RNAi表达载体并成功转入农杆菌中,为探索盐芥WBC11功能的后续实验打下了基础.     

苦丁茶植物资源及分子鉴定研究进展

苦丁茶是我国传统的药用及饮用植物,具有多种功效,享有"绿色黄金"的美誉.我国具有丰富的苦丁茶植物资源,主要分布在我国长江以来各省,各地使用的植物类型有很大差别,以冬青科的冬青属和木犀科的女真属最为有名.根据文献报道,从本草考证、植物种类及资源分布、资源特征及分子生物学鉴定等方面,综述了苦丁茶植物资源及分子鉴定的研究进展.     

藏族迁移及族群关系的研究意义及研究现状

本文分析了藏族迁移及族群关系研究的重大意义,同时分析了目前的现状和所面临的问题.认为现有藏族起源迁移的研究在语言学、古人类学、历史学等学科的研究为主,而遗传学或分子生物学方面的研究相对较少;对西藏民族和文明的起源和迁移,还没有定论,学者们所做的工作还只是探讨性质的.本文提出以Y染色体SNPs和线粒体mtDNA多态性的分子生态学、生物信息学研究为主,与人类学家、藏医学家一起,综合人文学科研究成果,对藏族起源和迁移进行系统进行研究,是进行民族起源、族群关系及迁移研究的最佳方案.     

拟南芥磷酸肌醇特异性磷脂酶AtPLC6基因的克隆与表达

利用文库筛选和RT-PCR方法, 从拟南芥中克隆到长度为1954 bp, 包括全长1734 bp编码区的AtPLC6 cDNA, 推测其编码一含有578个氨基酸的多肽, 其等电点为7.24, 分子量为66251.84 Da. 在GenBank中进行序列比对发现, AtPLC6为一新发现的拟南芥PI-PLC基因. 对推测的氨基酸序列结构的分析表明, AtPLC6具有EF手性结构、X结构域、Y结构域和C2结构域, 与植物中已知的其他磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)在结构上相似, 类似于动物中典型的δ-型磷酸肌醇特异性磷脂酶. 将AtPLC6的编码区序列插入原核表达载体后进行了原核表达, 纯化的AtPLC6重组蛋白可水解PIP2产生IP3和DAG, 且水解活性呈明显的钙依赖特性, 反应的最适Ca²⁺浓度为10 μmol/L. Northern分析结果表明, 在检测的根、茎、叶、花、果和幼苗中均有AtPLC6 mRNA的转录, 但转录水平较低. 用ABA, NaCl, 冷和热等胁迫处理的实验表明, AtPLC6 mRNA的转录受到冷胁迫的诱导, 而受ABA, NaCl和热等胁迫影响较小, 推测AtPLC6可能参与了植株对冷胁迫的响应.     

豌豆肌动蛋白异型体(PEAc1)与绿色荧光蛋白融合基因的原核表达与特性分析

肌动蛋白普遍存在于真核生物细胞中, 并在细胞生命活动中发挥重要作用. 在细胞中, 肌动蛋白多以异型体(isoform)形式存在. 植物肌动蛋白异型体的大量获得和理化特性分析一直是一个难题. 对豌豆肌动蛋白异型体PEAc1与组氨酸标签(His-tag)、绿色荧光蛋白(GFP)进行了基因融合和原核表达. 通过脲变性、梯度脲透析复性、镍柱亲和层析的方法从包涵体中纯化出大量、高纯度的PEAc1-GFP融合蛋白(> 2 mg/L培养物). 理化特性分析表明, 它同鸡骨骼肌肌动蛋白一样, 单体PEAc1-GFP能与DNaseⅠ结合并显著抑制后者酶活性; 单体PEAc1-GFP能聚合成带有绿色荧光的丝状结构; 聚合的PEAc1- GFP能被微丝的特异标记物鬼笔环肽(phalloidin)标记; PEAc1-GFP与鸡骨骼肌肌动蛋白的聚合曲线趋势基本一致, 聚合临界浓度为0.24 μmol/L; 聚合的PEAc1-GFP能激活肌球蛋白Mg-ATPase活性, 其激活比率随浓度的增加而增加, 在1 mg/mL浓度下, 能激活4倍以上. 上述结果表明, 带有组氨酸标签和GFP标记的PEAc1表现出和天然肌动蛋白相似的理化特性; 基因融合、原核表达、变性、复性及亲和纯化是获得大量高纯度植物肌动蛋白异型体的有效方法.