烟草节杆菌02181肌酸酶的纯化及理化特性

采用DEAE-纤维素和羟基磷灰石层析联合使用的纯化程序,从烟草节杆菌02181株提取纯化了肌酸酶.比活性由0.92 U/mg上升至124.44 U/mg,酶被提纯了135.26倍,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一区带,最终收率达52.95%.特性研究显示此酶的相对分子量为84500,等电点为4.80,在磷酸盐缓冲体系中,最适pH为6.50,pH7.00环境下耐受性最好,最适温度为35℃,米氏常数(Km)为46.50 mmol/L,最大反应速度(Vmax)为8.20 μmol/min.Cu2 、SDS可使酶完全失活,Hg2 、Cd2 、Zn2 和Fe3 明显抑制酶活性,Mg2 、Mn2 、Brij 35、Triton X-100和邻菲饶啉对酶活性有一定的抑制作用,EDTA对酶活性无明显影响,而Ca2 和NaN3对酶有一定的激活作用.络合剂邻菲饶啉和EDTA对酶活性的抑制试验表明此酶属于金属酶类.     

一种无指导的情感短语极性判别方法

在情感分析任务中,情感词或情感短语的极性判别是一项非常重要的任务。提出一种新的基于无指导学习的情感短语极性判别的方法。在该方法中,首先从新闻网站上抓取大量无标注的新闻评论数据。经过去除噪音并进行分词和词性标注之后,使用预先设定的模板抽取情感短语。然后人工标注少量种子词。通过分析种子词和情感短语的共现信息,最终得到情感短语的极性值。实验证明,这种方法可以有效判别情感短语的极性,并且能够用于句子级别的情感倾向分析。     

黄豆脲酶的提取与性质研究

为解决脲酶的国产化问题，建立了从黄豆中提取脲酶的全套流程，主要包括醋酸盐缓冲液提取、亚硫酸钠盐析和离子交换色谱等步骤，操作简便，成本低廉。收率达４４．０９％。产品比活性达６７．１５Ｕ／ｍｇ蛋白，可满足临床测定尿素的需要。再经分子筛色谱，可获得更纯的黄豆脲酶（比活化达１１５９．６７Ｕ／ｍｇ 蛋白）。酶性质研究结果显示，黄 豆脲酶的分子量为２９３５００，ｐＩ为３．９，在ＥＤＴＡ和Ｔｒｉｓ－琥到缓冲系统中     

肌酐测定工具酶产生菌-烟草节杆菌02181的筛选及其产酶条件

肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶是肌酐测定酶学方法的主要工具酶，我们从兰州市郊土壤中筛选到一株能同时高产这3种酶的菌株02181，经中国科学院微生物研究所鉴定为烟草节杆菌，正式定名为烟草节杆菌02181(Arthrobacter nicotianae 02181)．该菌适宜的培养温度为28℃；增加氧溶量有利于细菌细胞生长和产酶；肌酐的存在对产酶至关重要，推测为酶基因开放的诱导剂；蛋白胨是该菌生长和产酶的良好氮、碳源；在有肌酐和蛋白胨存在时，添加葡萄糖能促进细菌细胞生长，但产酶量降低；镁盐、钾盐和磷酸盐为细菌生长和产酶所必需．优化产酶条件后，肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶的最高产酶量分别达145．00U／g湿菌、75．77U／g湿菌和21．30U／g湿菌．该菌不仅具有用于发酵生产的潜力，也为我们进行肌酐测定3种主要工具酶的基因克隆奠定了基础。     

葡萄糖氧化酶与血糖试剂盒的研制

葡萄糖氧化酶是测定血糖的关键工具酶。本文研究了用点青霉As.3.3871菌株发酵生产葡萄糖氧化酶的工艺和配制酶试剂盒的方法,研制的产品经检测符合国家卫生部临床检验中心的技术标准,临床验证表明与国内同类产品品质相同,填补了西北地区的空白,有良好的应用前景。     

肿大地杆菌脲酶 的产生条件、纯化、 理化特性及应用研究

从农家土厕粪土中筛选培育出一株脲酶高产菌株,经中国科学院微生物研究所检测鉴定定名为肿大地杆菌,已被中国科学院微生物菌种保藏中心收藏(As1.2690)。该菌株对人畜无致病性,经强化培养条件后每克湿菌产脲酶279.13U。提取纯化的菌体脲酶经测定其分子量为257000,等电点3.40,Km值为0.0403mol·L     

用于镧/锕分离的绿色溶剂——离子液体的理论研究展望

简述了离子液体(Ionic Liquids,ILs)的概念和结构分类及ILs在乏核燃料后处理循环中应用的意义,详细介绍了ILs在镧系、锕系元素分离中的研究现状,并提出未来工作将采用第一性原理和分子动力学计算相结合的方法对ILs体系进行理论研究.     

黄豆脲酶波氏法尿素测定试剂盒的研制与应用

探索了黄豆脲酶用作尿素测定工具酶的反应条件,配制成脲酶－Ｂｅｒｔｈｅｌｏｔ法尿素测定试剂盒,并通过严格的基础和应用评价实验,对试剂盒的分析性能进行了客观评价。其测定线性范围上限达到３５．７０ｍｍｏｌ／Ｌ尿素（１００ｍｇ／ｄＬ尿素氮）,平均回收率为９８．５５％,精密度（ＣＶ％）为０．６６％,与国家定型产品对照测定４２例临床血清尿素标本,两者测定结果高度相关。结果表明用黄豆脲酶替代进口巨豆脲酶研制的麦     

丙酮酸氧化酶在临床生化检验中的应用

阐述了丙酮酸氧化酶的来源、特性、基因克隆和在临床生化检验中的应用，包括丙酮酸、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、丙酮酸激酶、无机磷酸、3-巯基丙酮酸转硫酶和尿素等的测定。