黄雀、黄喉鹀延髓听觉神经核团的形态学研究与比较

用冰冻切片及尼氏染色法观察了鸣禽类黄雀(carduelisspinlaus)与黄喉鹀(Emberizaelegans)低位脑干中的听觉核团的位置、形态及细胞组成并进行了比较.结果表明,组成听觉上行通路第一级中继站的两对耳蜗核(Nucleuscochear),即延髓的巨细胞胲(Nuclcusmagnocellularis.NM)和角状核(Nucleusamgularis,NA)有明显的形态学差异.巨细胞核呈卵圆形,其细胞均为圆形或椭圆形,胞体较大,长径为25-30μm,突起较少.而角状核呈三角形,核内包含各种类型的细胞,其中有纺缍形、多极型和卵圆形等,胞体大小不等,长径为12-25μm,突起较长.由此提示这两对耳蜗核可能有不同的功能.延髓层状核(Nucleuslaminavis,NL)是听觉上行通路中的第二级中继站,核团呈棒状或卷曲状,中央部呈"Z”或"S”字形,细胞呈层状排列,胞体呈长梭形或多极型,长径为20-25μm,突起较长.本文为进一步研究鸣禽类的听觉机能及声源定位等提供了一定的形态学基础.     

成年雌雄八哥端脑室带区新生细胞增殖的差异比较

用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记雌雄成年八哥(Acridotheres cristatellus)端脑内的新生细胞,实验鸟注射BrdU后存活2h,通过ABC免疫组织化学实验方法进行染色,观察成年雌雄八哥端脑鸣唱中枢弓状皮层粗核(RA)、端脑高级发声中枢(HVC)、前脑基底神经节中纹状体的X区(Area X)冠状切面室带区(VZ)内的新生细胞增殖差异.结果如下:1)在RA、HVC和X区冠状切面整段VZ内雄鸟新生细胞增殖能力高于雌鸟,具有明显的性双态性;2)HVC和X区冠状切面分段VZ内雄鸟的新生细胞增殖能力高于雌鸟,RA冠状切面雌雄差异不显著.结果表明:成年八哥端脑VZ不断的产生新生细胞,并且雌雄八哥有显著的差异,这可能与雄性更善于鸣啭有关.     

鸣禽间脑听觉卵圆核壳区脑啡肽的免疫组织化学？…

应用尼氏染色及脑啡肽免疫组织化学方法研究了鸣禽白腰文鸟（Ｌｏｎｃｈｕｒａ ｓｔｒｉａｔａ）间脑听觉中－卵圆核（ｎ．Ｏｖｏｉｄａｌｉｓ Ｏｖ）中心核及其壳区（ｓｈｅｌｌ）的形态学特征,再应用神经示踪剂ＢＤＡ（ｂｉｏｔｉｏｎｙｌａｔｅｄ ｄｅｘｔｒａｎ ａｍｉｎｅ）对壳区的神经投射了研究,结果发现（１）脑啡肽免疫组织方法尼氏染色更能区分中心核及壳区,仅Ｏｖ壳区存在脑啡肽纤维或细胞,而忠订户站不存在;     

一种牛精子膜蛋白的纯化及在生殖中的作用

牛精子经ψ=0.5%的NP-40洗脱后,先经伴刀豆凝集素Con A(Concanavalin A)亲和层析分离,经SDS-PAGE电泳,得到相对分子质量Mr分别为32×103,26×103,20×103的3种与Con A结合的糖蛋白CBG(Con A binding glycoprotein).再将亲和层析分离所得蛋白成分经葡聚糖凝胶(Sephadex G-100)层析柱进一步纯化,得到Mr为26×103的单一成分.将26×103 CBG免疫兔后制得抗血清,经PAP免疫组织化学染色发现:26×103的CBG抗原主要分布于牛精子的顶体区,同时鼠精子表面也有同样分布,说明26×103的CBG抗原具有种同保守性.后将26×102的CBG免疫雌鼠,发现其产仔率由对照组的(8.5士2.6)只(n=12)减少到(4.3士1. 8)只(n=24),经t检验(不配对,单尾),二者间差异极显著(p＜0.001).本实验结果表明:26×103的CBG在精卵结合中可能发挥重要作用,并有可能开发为人工避孕疫苗.     

鸣禽间脑听觉卵圆核壳区脑啡肽的免疫组织化学及神经联系

应用尼氏染色及脑啡肽免疫组织化学方法研究了鸣禽白腰文鸟(Lonchura striata)间脑听觉中继核--卵圆核(n. Ovoidalis Ov)中心核及其壳区(shell)的形态学特征,再应用神经示踪剂BDA (biotionylated dextran amine)对壳区的神经投射进行了研究.结果发现: (1) 脑啡肽免疫组织化学方法较尼氏染色更能区分中心核及壳区,仅Ov壳区存在脑啡肽纤维或细胞,而中心核几乎不存在;(2) Ov 壳发出纤维投向端脑听区L2b, L1 ,L3,下丘脑腹内侧核(ventromedial nucleus VMN)和下丘脑前内侧核(n. anterior medialis hypothalami AM); (3) Ov壳接受端脑古纹状体粗核(robust archistriatum RA)壳区、中脑背内侧核(mesencephalicus lateralis pars dorsalis MLd)与丘间核(n. intercollicularis ICo)界面区的投射.首次发现鸣禽卵圆核壳区同非鸣禽相似,也与下丘脑有神经投射联系,它为听觉发声引起内分泌活动及有关行为的改变提供了神经结构基础.     

画眉和白腰文鸟端脑新生神经细胞的起源和分布

用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记DNA,ABC免疫细胞化学的方法,观察成年画眉(Garrulax canorus)和白腰文鸟(Lonchura striata)端脑神经前体细胞的产生和分布特点.结果如下:1)胸肌注射BrdU短时程组(存活1~5 d),在端脑室带区外侧壁(LVZ)有大量的新生标记细胞,并在纹状体腹侧的室带区(VZ)形成标记细胞增殖热点;2)注射BrdU长时程组(存活15~30 d),在画眉高级发声中枢(HVc)、HVc壳、高位发声运动中枢———古纹状体栎核(RA)内有一些新生标记细胞,在端脑靠近LVZ的区域有较多的标记细胞,但在白腰文鸟的HVc、HVc壳、RA内未见到标记细胞.结果表明:1)新生神经细胞起源于端脑VZ;2)画眉每天都有一些新生神经前体细胞迁移到HVc和RA内,而白腰文鸟成年后HVc和RA很少有新生神经细胞代替旧的神经元,这与白腰文鸟成年后不需要学习新语句的行为是一致的.推测在画眉HVc和RA内能不断地产生新生标记细胞,这可能与它们需要不断学习新的鸣啭语句有关,而且这些新生的细胞在雄、雌画眉中可能具有同样的功能.     

成年画眉前脑新生神经细胞的增殖和定位

用BrdU标记DNA,ABC免疫细胞化学的方法,观察成年画眉前脑神经前体细胞的产生和分布特点.结果:1)在胸肌注射BrdU存活1~5 d,在前脑室带区(VZ)有大量的新生标记细胞,并形成标记细胞增殖热点区;2)注射BrdU存活15~30 d,在高级发声中枢(HVc)、HVc壳、高位发声运动中枢-古纹状体栎核(RA)、新纹状体尾端(NC)内有一些新生标记细胞,在靠近LVZ的区域有较多的迁移细胞.结论:新生神经细胞起源于前脑VZ,并且每天都有一些新生细胞迁移到HVc、HVc壳、NC和RA内,提示这些核团内不断地产生新生细胞,可能与它们需要学习新的鸣啭语句有关.     

Notch和Wnt信号通路联合对雏鸡听觉毛细胞再生的影响

哺乳类听觉毛细胞(hair cell,HC)损伤后无法再生,鸟类听觉毛细胞损伤后可以再生,研究鸟类毛细胞再生机制将会为研究哺乳动物毛细胞再生提供理论依据.本文选取出生后7d的小鸡作为动物模型,对小鸡基底乳突(basilar papilla,BP)进行体外培养,研究鸟类基底乳突毛细胞再生过程中Notch和Wnt信号通路的作用.研究结果表明:Wnt(Wnt/β-catenin)信号通路与Notch信号通路都对毛细胞的再生作用显著,新生的毛细胞主要来源于支持细胞(supporting cell,SC);抑制Notch信号通路会促进支持细胞转分化变成毛细胞,这个过程会消耗大量的支持细胞,毛细胞的正常功能离不开支持细胞的营养和支撑,支持细胞的过度消耗对长远再生是不可取的;Wnt通路的激动可以促进支持细胞的增殖.本文联合2种信号通路,同时抑制Notch信号通路、激动Wnt信号通路,使大量支持细胞转分化形成毛细胞并不断促进支持细胞的增殖,使毛细胞的再生效果达到最佳状态.     

朱鹮听觉发声中枢和内分泌核团内P物质的定位

朱鹮为世界濒危物种、用免疫组织化学方法对朱鹮脑内听觉一发声中枢和内分泌核团中的P物质免疫阳性神经细胞、终末和纤维进行了定位：1）在听觉通路中的延髓耳蜗核、脑桥腹部外侧丘系核、中脑背外侧核壳、中脑丘间核壳、丘脑卵圆核壳等有P物质阳性纤维和终末;在脑桥橄榄核有P物质阳性神经细胞;2）在发声通路中的气管呜管亚核、中脑丘间复合体背内侧核、丘脑前背外侧核内部、古纹状体腹部中间区有P物质阳性神经细胞和终末;3）在视前区前核、下丘脑外侧核,下丘脑腹内侧核等内分泌核团有P物质阳性神经细胞。结果提示：P物质在听觉通路和听觉旁通路、发声通路和生殖内分泌相关的核团中表达丰富,鸟脑中的P物质可能参与听觉和呜叫行为以及交配和生殖等生理功能的调制。