一种快速检测植物病毒RNA蓄积量的竞争PCR方法

用Oligo6.6软件在pUC18上设计1对比目的基因多100～200 bp的内参引物,摸索了目的基因和内参共同扩增的竞争PCR反应条件,测定了嘧肽霉素处理对烟草组织中烟草花叶病毒RNA相对含量的影响,同时用间接ELISA方法验证了该方法.试验结果表明:竞争PCR的方法能够快速、相对准确的测定植物组织中病毒RNA蓄积量的变化情况.     

4%嘧肽霉素水剂的毒性和防效

对4%嘧肽霉素水剂进行了毒性试验和防效测定。结果表明:4%嘧肽霉素水剂的大鼠急性经口毒性半致死剂量LD50>4640mg/kg,急性经皮毒性LD50>2150mg/kg,对皮肤和眼均无刺激性,属于低毒生物农药。该药剂对植物病毒病有较好的防治效果,在第三次施药后10天观察,各施用浓度对番茄、辣椒和烟草的病毒病的防效为60%～80%,显著高于对照药剂病毒A和植病灵。     

过氧化物酶活性与烟草脉坏死病抗性的关系

测定了接种马铃薯Y病毒脉坏死株系后转PVY－N1b基因的抗性烟草NC89和非转基因敏感烟草NC89的叶片组织透性和过氧化物酶活性,并对过氧化物酶同工酶进行了电泳分析,结果表明：抗、敏烟草叶片的组织透性与叶片内过氧化物酶活性的变化趋势一致,两者在接种后均呈增高趋势,且敏感烟草的增高幅度明显高于抗性烟草;接种后,两者的过氧化物酶同工酶均出现了一条新酶谱,抗性烟草植物的新酶带在接种后第2天开始出现,而敏感烟草的新酶带则在接种后第6天开始出现,且活性明显强于抗性烟草。     

嘧肽霉素对烟草花叶病毒在不同寄主上的防效研究

嘧肽霉素是一种新型抗病毒生物农药，针对烟草花叶病毒的不同系统寄主进行了该药剂的防效实验．结果表明：嘧肽霉素对不同系统寄主上的TMV引起的病毒病害都具有很好的防效，对TMV侵染烟草引起的烟草病毒病害的预防较为显著，抑制率达80．4％，在辣椒、番茄上也具有很好的防治效果．     

嘧肽霉素发酵培养基及发酵条件的优化

通过单因子试验和多因子均匀试验确定了嘧肽霉素产生菌不吸水链霉菌的摇瓶发酵条件。发酵培养基最佳配方为花生饼粉(2%),可溶性淀粉(8%),酵母粉(0.3%),(NH4)2SO4(1%),CaCO3(0.65%),NaCl(0.45%)。250 mL三角瓶装液量30 mL,培养基初始pH=6,28℃,在220 r.min-1摇床上发酵120 h,可获得较高的嘧肽霉素产量,抑菌圈直径可达32 mm,增产31%。