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1.
为研究真菌紫杉醇合成相关基因的功能,从产紫杉醇真菌枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A03231的DNA和c DNA全长序列(918 bp).结果表明:该基因不含内含子,其编码产物含305个氨基酸,与短链脱氢酶/还原酶一致性为64%,预测蛋白分子量为33071.5 Da,不存在信号肽,含有2个跨膜结构.Unigene A03231以单拷贝形式存在于基因组,在0~30 h内其表达水平随茉莉酸甲酯诱导表现为先升高后降低.构建了该基因的原核表达菌株,初步优化了其在大肠杆菌BL21中的诱导表达条件为:诱导温度28℃,IPTG浓度0.6 mmol/L,诱导时间8 h.为深入分析该基因的催化功能奠定了基础.  相似文献   
2.
目的利用非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol,研究其对紫杉醇耐药性的分子机理.方法通过长时间低浓度的紫杉醇处理A549细胞的方法获得其耐药细胞株A549/taxol,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR观察其凋亡基因的表达情况,并通过不同siRNA处理细胞进行基因沉默,研究其在不同遗传背景下对紫杉醇的耐受情况.结果发现非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol的基因表达紊乱,表现为ING5的高表达抑制了凋亡基因Bcl-2的表达水平,而Bcl-2是紫杉醇诱导细胞凋亡所必需的.结论以上结果初探了A549对紫杉醇耐药性的机制,为探寻紫杉醇化疗新策略提供了新的思路.  相似文献   
3.
紫杉醇是目前最新的具有很好疗效的抗癌药物,本文对紫杉醇发现以来的最新研究进展进行了比较详尽的综述。包括以下几个部分:1.紫杉醇的发现和历史;2.紫杉醇的药效;3.紫杉醇的来源;4.紫杉醇的生物合成途径及其相关酶基因的研究。  相似文献   
4.
红豆杉组织、细胞培养物紫杉醇快速检测   总被引:5,自引:0,他引:5  
利用薄层层析,高效液相色谱,酶联免疫吸附等方法对国内4种1变种红豆杉及其组织,细胞培养物进行紫杉醇快速定性,定量检测,试验结果表明,国内4种1变种红豆杉及其组织,细胞培养物中都含有紫杉醇,其中东北红豆杉及其培养物中紫杉醇含量较高。  相似文献   
5.
以曼地亚红豆杉枝叶为材料制备紫杉醇浸膏, 对紫杉醇的提取条件进行优化选择, 结果表明: 实验室条件下, 乙酸乙酯与丙酮体积比为1∶1, 先用超声波提取25 min, 然后在100 r/min, 50 ℃条件下加热振荡提取3 h, 重复提取4次即可. 同时对曼地亚红豆杉之枝叶中紫杉醇的提取进行了中试条件探索, 结果表明: 利用95%工业酒精作为提取溶剂, 在减压回流提取的条件下, 每次提取3 h, 重复4次即可基本将紫杉醇完全提取出来.  相似文献   
6.
红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展   总被引:9,自引:0,他引:9  
综述了近年来红豆杉细胞培养生产紫杉醇的研究进展, 包括红豆杉细胞培养生产紫杉醇的代谢调节、无机盐、植物生长调节因子、糖分及其它因素对红豆杉细胞生长和紫杉醇生产的影响等.着重介绍了前体饲喂、添加抑制剂和添加诱导子对红豆杉细胞生长及紫杉醇生产的影响.  相似文献   
7.
The kinesin-related protein HsEg5 plays essential roles in mitotic spindle dynamics. Although inhibition of HsEg5 has been suggested as an aid in cancer treatment, the effects of such inhibition on human cells have not been characterized. Here we studied the effects of monastrol, an allosteric HsEg5 inhibitor, on AGS and HT29 cell lines and compared them to those of taxol. While both cell lines were similarly sensitive to taxol, AGS cells were more sensitive to monastrol. The differences in sensitivity were determined by the degree of inhibitory effect on cell proliferation, reversibility of monastrol-induced G2/M arrest, intracellular phenotypes and induction of apoptosis. In both cell lines, monastrol-induced apoptosis was accompanied by mitochondrial membrane depolarization and poly-ADP-ribose polymerase 1 cleavage. In AGS, but not HT29 cells, monastrol-induced apoptosis involved a prominent cleavage of procaspases 8 and 3. While in AGS cells, monastrol induced the formation of symmetric microtubule asters only, in HT29 cells, asymmetric asters were also formed, which may be related to specific HsEg5 functions in HT29 cells.Received 18 February 2004; received after revision 30 May 2004; accepted 16 June 2004  相似文献   
8.
模拟移动床分离紫杉醇   总被引:1,自引:0,他引:1  
以东北红豆杉树叶为原料,采用无毒、无污染的乙醇作为提取溶剂.在高分子树脂柱和模拟移动床色谱(SMBC)系统上逐级提纯紫杉醇,除去大量非紫杉烷与紫杉烷类杂质,得到了高纯度的产品、同时,对紫杉醇前处理过程中洗脱液条件,随后的SMBC系统实验中的切换时间等条件进行了优化,并总结出一套优化操作条件,为纯化紫杉醇提供了合理的工艺路线.  相似文献   
9.
水解血清白蛋白对紫杉醇的化学修饰   总被引:2,自引:0,他引:2  
紫杉醇对卵巢癌和乳腺癌有良好的疗效 ,但它不溶于水 ,使临床应用很不方便 .用水解的牛血清白蛋白修饰紫杉醇 ,可提高其水溶性  相似文献   
10.
介绍了采用质谱直接进样技术测定紫杉醇的方法,与传统的液相法测定紫杉醇技术比较,可降低昂贵的标样使用量,免去流动相的费用.讨论了质谱运行条件的选择和操作中应注意的问题.  相似文献   
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