脊髓灰质炎病毒I型单克隆抗体的制备

目的: 为建立脊灰病毒Sabin株I型特异的单克隆抗体．方法:以Vero细胞增殖病毒并用蔗糖密度梯度离心法纯化后,用病毒免疫SPF级Balb/c小鼠．取小鼠免疫脾淋巴细胞与SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞进行细胞融合,通过间接 ELISA 法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞,并用有限稀释法克隆化．用细胞培养法制备脊灰病毒单抗,并以中和试验测定单抗效价．结果:获得了8株分泌抗脊灰病毒Sabin株I型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中1株G8G7能够稳定分泌抗体．间接ELISA 法测得单抗的效价为1∶8,中和试验测得中和抗体的效价为1∶58．结论:G8G7分泌的抗体为抗脊灰病毒Sabin株I型特异的单克隆抗体.     

应用PCR-RFLP法作脊灰炎病毒型内分析的研究

用PCR-RFLP法对近年来从麻痹病人分离到的26株脊灰炎病毒(PV)作了型内分析研究。16株PV₁的RFLP图式呈现多样性,毒株的图式可与Sabin1型疫苗株完全相同或不同,某些毒株亦可无电泳条带出现。7株PV₂与3株PV₃的RFLP图式则分别与疫苗株Sabin2型和3型完全相同。全面分析这些RFLP后,我们认为16株PV₁为野毒株,而7株PV₂及3株PV₃则可能是疫苗相似株。鉴于近年来广西的麻痹病例仍主要由PV₁所致。故此,加强突击普服OPV运动及作好分离毒株的型内分析已成为消灭脊灰炎的关键。     

用微量单管RT－PCR快速检测及定型脊髓灰质炎病毒

介绍一种逆转录─聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的简单快速检测和定型脊髓灰质炎病毒（ＰＶ）的方法，无需提取ＰＶＲＮＡ，共用一种缓冲系统，将ＲＴ和ＰＣＲ试剂混合在２０μＬ反应体系中，整个操作可置于一不间断温度循环程度程序中完成。一步法ＲＴ－ＰＣＲ与常规ＲＴ－ＰＣＲ及中和抗体试验对ＰＶ的检测结果完全一致，它的检测敏感度可达５ＴＣＩＤ（５０）／ｍＬ。该法需要的时间，费用和污染的都大大减少，而且特别适于临床常规诊断和鉴别ＰＶ的需要。     

应用PCR－RFLP法作脊灰炎病毒型内分析的研究

用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法对近年来从麻痹病人分离到的２６株脊灰炎病毒（ＰＶ）作了型内分析研究。１６株ＰＶ１的ＲＦＬＰ图式呈现多样性，毒株的图式可与Ｓａｂｉｎ１型疫苗株完全相同或不同，某些毒株亦可无电泳条带出现。７株ＰＶ２与３株ＰＶ３的ＲＦＬＰ图式则分别与疫苗株Ｓａｂｉｎ２型和３型完全相同。全面分析这些ＲＦＬＰ后，我们认为１６株ＰＶ１为野毒株，而７株ＰＶ２及３株ＰＶ３则可能是疫苗相似株。鉴于近年来广西的麻痹病例仍主要由ＰＶ１所致。故此，加强突击普服ＯＰＶ运动及作好分离毒株的型内分析已成为消灭脊灰炎的关键。     

应用聚合酶链反应检测环境污水脊髓灰质炎病毒的研究

用聚合酶链反应技术检测５个市县１５份环境污水中肠道病毒，其中１１份阳性，与细胞中和试验鉴定阳笥结果符合率９０．９０％－１００％，该法不仅简单，敏感，特异分型，而且可作型内鉴别，使细胞中和试验分型和Ｔ特征型内鉴别所需１４ｄ缩短到２ｄ。为环境样品中脊髓灰质炎病毒污染提供了检测手段。     

用微量单管RT-PCR快速检测及定型脊髓灰质炎病毒

介绍一种逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的简单快速检测和定型脊髓灰质病毒（ＰＶ）的方法，无需提取ＰＶＲＮＡ共用一种缓冲系统，将ＲＴ和ＰＣＲ试剂混合在２０μＬ反应体系中，整个操作可置于一不间断温度循环程度程序中完成，一步法ＲＴ－ＰＣＲ与常ＲＴ－ＰＣＲ及中和抗体试验对ＰＶ的检测结果完全一致，它的检测敏感度可达５ＴＣＩＤ５０／ｍＬ，该法需要时间，费用和污染的都大大减少，而且特别适于临床常规诊断和鉴别