首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   47篇
  国内免费   3篇
  完全免费   13篇
  综合类   63篇
  2014年   4篇
  2013年   1篇
  2012年   5篇
  2011年   1篇
  2010年   3篇
  2009年   2篇
  2008年   7篇
  2007年   6篇
  2006年   5篇
  2005年   4篇
  2004年   4篇
  2003年   3篇
  2002年   6篇
  2001年   1篇
  2000年   5篇
  1999年   5篇
  1997年   1篇
排序方式: 共有63条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
绿色荧光蛋白基因mgfp4在水稻愈伤组织中的瞬时表达   总被引:10,自引:0,他引:10  
采用基因枪方法将适用于高等植物的绿色荧光蛋白基因mgfp4转化到水稻愈伤组织之中,获得高效瞬时表达,在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察到强烈绿色荧光。绿色荧光蛋白mGFP4生色团形成迅速,转化4h后就能观察到绿色荧光,并且持续时间较长,2d后才基本消退。  相似文献
2.
增强型绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建   总被引:4,自引:2,他引:2  
构建增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的真核表达载体pCDNA3.1( )-EGFP,转染至培养的Hela细胞中成功表达,并发出绿色荧光,证明EGFP一种良好的报告基因和筛选标记.  相似文献
3.
家蚕精子介导报告基因gfp和egfp转移技术的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
探讨家蚕精子介导基因转移技术能否有效地将外源基因导入并整合到家蚕基因组中,使之稳定遗传.分别进行了含gfp报告基因的pG350载体和含egfp报告基因的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体的精子介导基因转移实验.结果表明,导入线性pG350载体,在14个G0代实验蛾区的DNA样品中,有5个PCR检测为阳性,阳性率为35.7%;对G1代的PCR与Southern blot检测的结果证明,导入的gfp基因存在于G1代的家蚕基因组中.导入不同浓度或构型的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体时,对G0代的PCR检测结果表明,导入线性pMD-Fib-IE-EGFP组的PCR阳性率为61.2%,而导入环状质粒组的PCR阳性率为57.1%;导入环状pEGFP-N3组的PCR阳性率为46.2%;对部分PCR阳性蛾区进行Southern blot检测结果表明,导入的egfp基因整合在G0代家蚕基因组中.本研究的结果表明,家蚕精子介导基因转移能够将外源基因有效地导入、整合于家蚕基因组,并可遗传至G1代.  相似文献
4.
绿色荧光蛋白基因在裂殖酵母中的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
将绿色荧光蛋白基因编码区序列克隆到大肠杆菌-裂殖酵母穿梭质粒pREP3的BamHⅠ ̄SmaⅠ位点,使之位于一个受硫胺素抑制的启动子和终止子的控制之下,用该质粒转化裂殖酵母,转化菌落于阳光下呈绿色,在395nm紫外光下发出强烈绿色荧光,在荧光显微镜下,用蓝光激发,可见该基因的表达明显受硫胺素的抑制,在没有选择压力的条件下,质粒丢失现象很严重,在完全培养基上,只有20%的细胞发光,在丰富培养基上,发光  相似文献
5.
以含家蚕丝心蛋白重链基因同源片段的质粒pG350为出发质粒,插入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建成以EGFP为报告基因的同源重组质粒载体pMD-Fib-IE-EGFP,通过PCR及酶切鉴定表明EGFP以正确的方式插入到原始质粒中,通过脂质体介导法转染胃癌细胞能发出很强的绿色荧光,表明该质粒能够在真核细胞中表达,为进一步建立完善的家蚕转基因系统平台提供基因材料。  相似文献
6.
应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组芽孢杆菌(Baci1010).以GFP为标记研究该工程菌在仔猪和小鸡体内的动态分布.试验结果表明:投喂含质量分数为0.1%工程菌(Baci1010)菌液的全价配合饲料12h后,在仔猪和小鸡的肠道内可检测到该工程菌的存在,36h后在小鸡盲肠内该工程菌的数量达到(155±33)×105个/g,48h后在仔猪盲肠内该工程菌的数量达到(133±35)×105个/g,在仔猪和小鸡体内,该工程菌都能在肠道内迅速复活并繁殖成为有益菌.  相似文献
7.
研究重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞的感染效率及表达水平,可为痘苗病毒表达系统宿主细胞的正确选择提供依据.本研究利用重组绿色荧光蛋白基因的痘苗病毒WR—EGFP同时感染不同的哺乳动物细胞株,利用流式细胞仪检测EGFP的表达强度.共使用20种哺乳动物细胞株,其中10种人类组织细胞,2种猴组织细胞。8种小鼠组织细胞.结果表明,重组痘苗病毒wR-EGFP对鼠细胞系BHK21和人细胞系A-549的感染效率和表达效率最佳;整体看,痘苗病毒对多数灵长类动物细胞的感染效率和表达效率优于鼠细胞;对贴壁细胞的感染效率和表达效率明显优于悬浮细胞;但没有特别的组织偏嗜性。  相似文献
8.
由于绿色荧光蛋白可在活组织或细胞中直接检出 ,因而近年已在转基因植物的研究中用作报告基因 ,这样可在植物生长的任何阶段进行活体筛选和鉴定。本研究利用线粒体定位序列对改良 gfp基因在转基因烟草中的表达进行了观察 ,结果表明 :将GFP直接在细胞质中大量表达会对植物细胞产生毒性 ,从而影响植物细胞的分化 ,而将其定位在线粒体中 ,则从转化细胞产生植株的频率明显增高。  相似文献
9.
Construction of Yeast Vectors with Resistance to Geneticin   总被引:2,自引:0,他引:2  
IntroductionYeast Saccharomyces cerevisiae (S.cerevisiae) hasbeen widely used in molecular biology as well asinthe industrial production.Its genetic backgroundhas been well studied and a series of cloning andexpression vectors have been constructed for DNAtransformation into yeast[1 ] .The selection markersof these conventional vectors are usually H IS3 ,TRP1 ,LEU2 ,and URA3 [1 ,2 ] . These selectionmarkers are responsible for the biosynthesis ofsome amino acids and consequently the hos…  相似文献
10.
Transgenic somatic cell nuclear transfer is a very promising route for producing transgenic farm ani-mals. Research on GFP transgenic pigs can provide useful information for breeding transgenic pigs, human disease models and human organ xenotransplantation. In this study, a liposomal transfection system was screened and transgenic embryos were reconstructed by nuclear transfer of GFP positive cells into enucleated in vitro matured oocytes. The development of reconstructed embryos both in vitro and in vivo was observed, and GFP expression was determined. The results showed that porcine fe-tal-derived fibroblast cells cultured with 4.0 μL/mL liposome and 1.6 μg/mL plasmid DNA for 6 h re-sulted in the highest transfection rate (3.6%). The percentage of GFP reconstructed embryos that de-veloped in vitro to the blastocyst stage was 10%. Of those the GFP positive percentage was 48%. Re-constructed transgenic embryos were transferred to 10 recipients. 5 of them were pregnant, and 3 de-livered 6 cloned piglets in which 4 piglets were transgenic for the GFP as verified by both GFP protein expression and GFP DNA sequence analysis. The percentage of reconstructed embryos that resulted in cloned piglets was 1.0%; while the percentage of piglets that were transgenic was 0.7%. This is the first group of transgenic cloned pigs born in China, marking a great progress in Chinese transgenic cloned pig research.  相似文献
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号